维生素E（Vitamin E，VE）试剂盒说明书

微量法 100T/48S

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性wei生素，其水解产物为生育酚，是生物体中最主要的抗氧化剂之一，能阻止不饱和脂肪酸收到过氧化作用的损伤，维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能，具有延缓衰老、预防溶血性贫血作用，在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。

测定原理：

VE 还原Fe³⁺为Fe²⁺，Fe²⁺与 1,10-菲罗啉产生有色络合物，在 530nm 有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、漩涡震荡仪。

NADH，进一步采用 MTT 还原法检测。

维生素E试剂盒-常备现货

组成：

自备仪器和用品：

天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、漩涡震荡仪。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

样本处理：

1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1ml 提取液）加入提取液，匀浆后用提取液定至 1ml，定至在漩涡混匀仪上震荡 5min，于 25℃，5000g 离心 10min，取上层测定。

2. 细胞：按照细胞数量（10⁴ 个）：提取液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1ml提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）后在漩涡混匀仪上震荡 5min，于 25℃，5000g 离心 10min，取上层测定。

3. 血清：取 0.1ml，加 0.9ml 提取液，漩涡仪混匀上震荡 5min，于 25℃，5000g 离心 10min，取上层测定。

测定操作：

计算公式：

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y = 0.22x + 0.0065 R² = 0.9978

1. 按照蛋白含量计算

VE 含量（μg/mg prot）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V 反总÷（V 样×Cpr）

= 9.09×（△A -0.0065）÷ Cpr

2. 按照样本质量计算

VE 含量（μg/g）= （△A -0.0065）÷ 0.22×V 反总÷（V 样×W÷V 样总）

= 9.09×（△A -0.0065）÷ W

3. 按照细胞数量计算

VE 含量（μg/104 cell）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）

= 9.09×（△A -0.0065）÷ 细胞数量

4. 按照液体体积计算

VE 含量（μg/ml）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V 反总÷V 样×10

= 90.9×（△A -0.0065）

V 反总：反应总体积，0.2ml；V 样：加入样本体积，0.1ml；V 样总：加入提取液体积，1ml；Cpr：蛋白浓度，mg/ml；W：样本质量，g

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 0.11x + 0.0065 R² = 0.9978

1. 按照蛋白含量计算

VE 含量（μg/mg prot）=（△A -0.0065）÷ 0.11×V 反总÷（V 样×Cpr）

= 18.18×（△A -0.0065）÷ Cpr

2. 按照样本质量计算

VE 含量（μg/g）= （△A -0.0065）÷0.11×V 反总÷（V 样×W÷V 样总）

= 18.18×（△A -0.0065）÷ W

3. 按照细胞数量计算

VE 含量（μg/10⁴ cell）=（△A -0.0065）÷ 0.11×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）

= 18.18×（△A -0.0065）÷ 细胞数量

4. 按照液体体积计算

VE 含量（μg/ml）=（△A -0.0065）÷0.11×V 反总÷V 样×10

= 181.8×（△A -0.0065）

V 反总：反应总体积，0.2ml；V 样：加入样本体积，0.1ml；V 样总：加入提取液体积，1ml；Cpr：蛋白浓度，mg/ml；W：样本质量，g

注意事项：

若反应体系产生沉淀，需要将样品进行适当的稀释，并在计算公式中乘以稀释倍数。

维生素E试剂盒-常备现货