His-Tag蛋白纯化磁珠是一种用于快速、高效纯化His标签融合蛋白的功能化材料。专为高效、快速纯化组氨酸标签蛋白而设计的一种新型功能化材料,可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,显著地简化了纯化工艺,降低了设备需求,适合科研和工业领域便捷快速地进行组氨酸标签蛋白的纯化工作。 His-Tag蛋白纯化磁珠与传统过柱层析纯化方式的对比:
1、纯化原理
- His-Tag蛋白纯化磁珠:基于磁性分离原理,磁珠表面螯合金属离子(如镍离子Ni²⁺或钴离子Co²⁺),通过与His标签蛋白中的组氨酸残基特异性结合,在磁场作用下实现目标蛋白的分离纯化。
- 传统过柱层析纯化方式:利用层析柱中固定相与流动相之间的物理化学作用差异,通过控制流速、缓冲液等条件,使不同蛋白质在柱中停留时间不同,从而实现分离纯化。
2、操作流程
- His-Tag蛋白纯化磁珠:无需装柱和过柱层析,无需多次离心、过滤,无需控制上样流速,操作简单快捷,熟练操作者1小时内可完成纯化。
- 传统过柱层析纯化方式:需要进行装柱、平衡柱、上样、洗脱等多个步骤,操作复杂,耗时较长,且对操作技术要求较高。
3、设备需求
- His-Tag蛋白纯化磁珠:无需昂贵的柱层析设备,只需简单的磁性分离装置。
- 传统过柱层析纯化方式:需要专业的层析设备,如层析柱、泵、检测器等。
4、纯化效率
- His-Tag蛋白纯化磁珠:一步纯化即可获得高达95%以上纯度的目标蛋白,产率一般为70%~80%,可轻松实现多样品平行处理。
- 传统过柱层析纯化方式:纯化效率受多种因素影响,纯度和产率可能因操作条件不同而有所差异,且难以实现高通量处理。
5、成本
- His-Tag蛋白纯化磁珠:虽然磁珠本身有一定成本,但无需额外的层析设备,且可重复使用,总体成本较低。
- 传统过柱层析纯化方式:需要购买昂贵的层析设备,且设备维护和耗材成本较高。
6、适用范围
- His-Tag蛋白纯化磁珠:广泛适用于细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞等分泌或胞内表达的可溶性组氨酸标签蛋白以及变性蛋白的纯化。
- 传统过柱层析纯化方式:适用于多种类型的蛋白质纯化,但对His-Tag蛋白纯化而言,磁珠法更具优势。
His-Tag蛋白纯化磁珠在操作简便性、纯化效率、设备需求和成本等方面具有明显优势,特别适合His-Tag蛋白的快速纯化和高通量处理。传统过柱层析纯化方式虽然适用范围更广,但在His-Tag蛋白纯化中操作复杂、耗时长、成本高。