血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity,TIBC)试剂盒说明书
微量法 100T/96S
测定意义:
血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力,其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。
Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物,在 562nm 处有特征吸收峰。碱性条件下,血清转铁蛋白可以与 Fe3+结合,剩余未结合的 Fe3+可以被还原成Fe2+,此时吸光度A1 与未结合Fe3+数量正相关;酸化后,转铁蛋白结合的Fe3+释放,并且进一步被还原成 Fe2+ ,此时吸光度 A2 与总Fe3+数量正相关。A2 减A1 与TIBC浓度呈正比。
产品名称 | BX6002-100T/96S | Storage |
试剂一:液体 | 30ml | 4℃ |
试剂二:液体 | 5ml | 4℃避光 |
试剂三:液体 | 5ml | 4℃避光 |
试剂四:液体 | 7ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
试剂三:液体 5ml×1 瓶,4℃避光保存。(临用前根据用量将A 液和B 液按 1:1 混合)
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。
1、分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长至 562nm。
2、操作表
对照管 | 测定管 | |
血清(μl) | 40 | |
试剂一(μl) | 320 | 280 |
试剂二(μl) | 40 | 40 |
混匀,37℃,10min | ||||
试剂三(μl) | 40 | 40 | ||
混匀,37℃,5min,对照管调零,取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板测定 562nm 处吸 光值A1,测完后立即加入试剂四 | ||||
试剂四(μl) | 60 | 60 | ||
混匀,37℃,5min,对照管调零,取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板测定 562nm 处吸 光值A2。ΔA=A2-A1。 |
总铁结合能力定义:37℃条件下,每升血清结合 Fe3+的μmol 数。
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线:y=0.5478x+0.0281,R2=0.9981
总铁结合能力TIBC(μmol/L)=(ΔA-0.0281)÷0.5478×V 反总÷V 样= 20.99×(ΔA-0.0281)
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y=0.2739x+0.0281,R2=0.9981
总铁结合能力TIBC(μmol/L)=(ΔA-0.0281)÷0.2739×V 反总÷V 样= 41.98×(ΔA-0.0281) V 反总:反应总体积,0.46ml;V 样:反应中样本体积,0.04ml
1. 吸光值大于 0.8,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。
2. 试剂二、试剂三有一定的毒性,操作时请做好防护措施。
3. 检测限为 4.78μmol/L。
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