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磷脂酶D（ Phospholipases D，PLD ）试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
磷脂酶 D（EC3.1.4.4）即磷脂酰dan碱水解酶，是催化磷酸二酯键水解和碱基交换反应的一类酶的总称，广泛存在于高等动植物和细菌等多种生物体中，具有参与细胞脂质代谢、信号传导、生物膜形成的抗逆境胁等生理功能。
磷脂酶D 催化水解磷脂酰dan碱末端的磷脂酰二酯键生成磷脂酸和dan碱，dan碱在dan碱氧化酶催化作用下生成甜菜碱和过氧化氢，过氧化氢在过氧化氢酶的作用下将 4-氨基安替bi林和重蒸酚氧化成粉红色物质，在 500nm 处有特征吸收峰。
产品名称 | BR6025-50T/48S | Storage |
提取液：液体 | 50ml | 4℃ |
试剂一：液体 | 55ml | 4℃避光 |
试剂二：液体 | 8ml | 4℃避光 |
试剂三：粉剂 | 1 瓶 | -20℃避光 |
试剂四：液体 | 35ml | 4℃避光 |
标准品：液体 | 1ml | 4℃避光 |
说明书 | 一份 | |
试剂三：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用前加 3ml 无水乙醇充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
天平、研钵、超速冷冻离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿、恒温水浴锅，无水乙醇。
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1ml 提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 5min，取全部上清于 4℃、100000g 离心 30min，弃上清，取沉淀溶于 1ml 试剂一。
2. 细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1ml提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后于 4℃，10000g离心 5min，取全部上清于 4℃、100000g 离心 30min，弃上清，取沉淀溶于 1ml 试剂一。
3. 血清：直接测定。
空白管 | 标准管 | 测定管 | |
试剂一（μl） | 100 | ||
试剂二（μl） | 150 | 150 | 150 |
标准品（μl） | 100 | ||
样品（μl） | 100 | ||
试剂三（μl） | 50 | 50 | 50 |
充分混匀，30℃反应 30min，沸水浴 10min，打开盖子，自然冷却 5min。 | |||
试剂四（μl） | 700 | 700 | 700 |
30℃反应 30min，于 1ml 玻璃比色皿，空白管调零，测定 500nm 处吸光值，分别记为 A 标准管和A 测定管。 | |||
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