游离胆gu醇（free cholesterol, FC）含量测定试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

FC 是构成细胞mo的主要成分，也是合成肾shang腺皮质激素、性激su、胆zhi酸及维sheng素 D 等生理huo性物质的重要原料。FC 浓度可作为脂代谢的指标。

测定原理：

FC 氧化酶催化 FC 生成△4-胆甾烯酮和H2O2，过氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替bi林和酚生成红色醌类化合物，在 500nm 有吸收峰，其颜色深浅与FC 含量成正比。

游离胆gu醇含量测定试剂盒   脂肪酸系列

组成：

标准品：液体 1ml×1 支，浓度为 0.5 μ mol/ml，4℃保存

自备仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

FC 的提取：

1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加 1ml 试剂一，超声波破碎 1min（强度 20％，超声 2s，停 1s），即FC 待测液。

3. 血清（浆）样品：直接测定。

测定操作：

1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 500 nm，蒸馏水调零。

2. FC 工作液的配制：临用前，吸取约 0.8ml 试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中，充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中，充分混匀，FC 工作液置于 37℃水浴 10min。用不完的工作液 4℃保存一周。

3. 标准管：依次在 1ml 玻璃比色皿中加入 100μl FC 标准液和 900μl FC 工作液，混匀，37℃静置 3h 后于500nm 测定A 标准管。

4. 测定管：依次在 1ml 玻璃比色皿中加入 100μl FC 待测液和 900μl FC 工作液，混匀，37℃静置 3h 后于500nm 测定A 测定管。

5、空白管：依次在 1ml 玻璃比色皿中加入 100μl 试剂一和 900μl FC 工作液，混匀，37℃静置 3h 后于 500nm测定A 测定管。

注意：

1、标准管和空白管只需测定一次。

2、若测定管产生白色浑浊，可以将待测液用异丙醇稀释 2~5 倍后测定，并在最后结果乘以相应倍数。计算公式：

1. 血清（浆）中FC 含量计算：

FC 含量（μmol /dL）= C 标准液×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）×100ml

=50×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）

C 标准液：0.5μmol/ml；100 ml：1dL=100 ml。

2. 组织中FC 含量计算：

(1) 按样本蛋白浓度计算

FC 含量（μmol / mg prot）= C 标准液×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷Cpr

= 0.5×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷Cpr

(2) 按样本鲜重计算

FC 含量（μmol / g 鲜重）= C 标准液×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷W

= 0.5×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷W C 标准液：0.5μmol/ml；Cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；W：样本质量，g/ml

3. 细胞、细菌中FC 含量计算：

FC 含量（μmol /10⁴ cell）= C 标准液×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷细菌或细胞（10⁴ cell

/L）

=0.5×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷细菌或细胞（10⁴ cell /L） C 标准液：0.5μmol/ml。

zui低检出限为 1nmol/ml。

游离胆gu醇含量测定试剂盒   脂肪酸系列