总胆gu醇（total cholesterol，TC）含量测定试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

TC 包括游离胆gu醇和胆gu醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆gu醇之总和。

测定原理：

利用酯酶催化胆gu醇酯水解生成游离胆gu醇（FC）和游离脂肪酸（FFA），从而把胆gu醇酯转化为 FC；进一步利用胆gu醇氧化酶催化FC 氧化，生成△4-胆甾烯酮和H2O2；最后利用过氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替bi林和酚，生成红色醌类化合物；在 500nm 有特征吸收峰，其颜色深浅与TC 含量成正比。

总胆gu醇含量测定试剂盒   脂肪酸系列

组成：

TC 标准品：液体 1ml×1 支，0.5μmol/ml，4℃保存。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

TC 的提取：

1、组织中TC 的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试剂一）进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心 10min，取上清，即TC 待测液。

2、细胞、细菌中TC 的提取：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加 1ml 试剂一，超声波破碎 1min（强度 20％，超声 2s，停 1s），即TC 待测液。

3、血清（浆）等样品：直接测定。

测定操作：

1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 500 nm，蒸馏水调零。

2. TC 工作液的配制：临用前，吸取约 0.8ml 试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中，充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中，充分混匀，TC 工作液置于 37℃水浴 10min。用不完的工作液 4℃保存一周。

3. 标准管：依次在 1ml 玻璃比色皿中加入 100μl FC 标准液和 900μl TC 工作液，混匀，37℃静置 3h 后于500nm 测定A 标准管。

4. 测定管：依次在 1ml 玻璃比色皿中加入 100μl FC 待测液和 900μl TC 工作液，混匀，37℃静置 3h 后于500nm 测定A 测定管。

5. 空白管： 依次在 1ml 玻璃比色皿中加入 100μl 试剂一和 900μl TC 工作液，混匀，37℃静置 3h 后于500nm测定A 测定管。

注意：标准管和空白管只需测定一次。

计算公式：

1. 血清（浆）中TC 含量：

TC（μ mol /dL）= C 标准液×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）×100

= 50×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）

C 标准液：0.5μmol/ml；100 ml：1dL=100 ml。

2. 组织中TC 含量：

(1) 按样本蛋白浓度计算

TC（μ mol/mg prot）= C 标准液×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷Cpr

= 0.5×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷Cpr

(2) 按样本质量计算

TC（μ mol / g 鲜重）= C 标准液×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷W

= 0.5×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷W C 标准液：0.5μmol/ml；样本蛋白浓度，mg/ml；W：样本质量，g/ml

3. 细胞、细菌中TC 含量：

TC（μ mol /10⁴ cell）= C 标准液×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷细菌或细胞（10⁴ cell /L）

= 0.5×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷细菌或细胞（10⁴ cell /L） C 标准液：0.5μmol/ml。

注意事项：

zui低检出限为 1nmol/ml。

总胆gu醇含量测定试剂盒   脂肪酸系列