铜蓝蛋白(Ceruloplasmin,Cp)测定试剂盒说明书
微量法 100T/48S
铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白,有运输铜的功能,同时具有氧化酶的活性,是细胞外液重要的抗氧化剂。
铜蓝蛋白催化 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物,在 645nm 处有特征吸收峰,依此可得铜蓝蛋白活性。
铜蓝蛋白测定试剂盒 抗氧系列-常备现货
产品名称 | BD6010-100T/48S | Storage |
试剂一:液体 | 10ml | 4℃ |
试剂二:液体 | 7ml | 4℃ |
试剂三:液体 | 15ml | 4℃避光 |
说明书 | 一份 |
试剂三:液体 15ml×1 瓶,4℃避光保存。(使用前 37℃预热)
天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。
1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 645nm,蒸馏水调零。
2、操作表
空白管 | 测定管 | |
样品(µl) | 30 | 30 |
试剂一(µl) | 90 | 90 |
试剂二(µl) | 60 | |
混匀,37℃预热 5min | ||
试剂三(µl) | 120 | 120 |
混匀,37℃反应 30min | ||
试剂二(µl) | 60 | |
混匀,25℃室温放置 5min,取 200µl 于微量石英比色皿/96 孔板中,测定 645nm 处吸光 |
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、按体积计算
酶活定义:37℃条件下, 每分钟每毫升样品与底物作用吸光度升高 0.01 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/ml)=ΔA×V 反总÷0.01÷V 样÷T = 33.33×ΔA 2、按鲜重计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每克样品与底物作用吸光值升高 0.01 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷0.01÷(W×V 样÷V 样总)÷T = 33.33×ΔA÷W 3、按蛋白浓度计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每毫克蛋白样品与底物作用吸光值升高 0.01 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/ mg prot)=ΔA×V 反总÷0.01÷(Cpr×V 样)÷T = 33.33×ΔA÷Cpr
V 样:0.03 ml;V 反总:0.3 ml;T:反应时间,30min;V 样总:加入提取液体积,1ml; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量,g
b. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、按体积计算
酶活定义:37℃条件下, 每分钟每毫升样品与底物作用吸光度升高 0.005 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/ml)=ΔA×V 反总÷0.005÷V 样÷T = 66.66×ΔA
2、按鲜重计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每克样品与底物作用吸光值升高 0.005 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷0.005÷(W×V 样÷V 样总)÷T = 66.66×ΔA÷W 3、按蛋白浓度计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每毫克蛋白样品与底物作用吸光值升高 0.005 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/ mg prot)=ΔA×V 反总÷0.005÷(Cpr×V 样)÷T = 66.66×ΔA÷Cpr
V 样:0.03 ml;V 反总:0.3 ml;T:反应时间,30min;V 样总:加入提取液体积,1ml; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量,g
试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性,请操作时做好防护措施。
铜蓝蛋白测定试剂盒 抗氧系列-常备现货
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