组织无机磷含量测定试剂盒说明书

微量法 100T/96S

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等，此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。

测定原理：

钼蓝与磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物质，通过测定 660nm 光吸收，即可计算无机磷含量。

组织无机磷含量测定试剂盒   离子系列

组成：

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前配制，加入 10 ml 蒸馏水，充分溶解后加入试剂二（全部），混匀。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

自备仪器和用品：

离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、和蒸馏水。

无机磷提取：

按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试剂一）进行冰浴匀浆。10000rpm，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

测定：

1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min，调节波长到 660 nm，蒸馏水调零。

2. 打开水浴锅，调节温度到 40℃。

3. 空白管：取 0.5ml EP 管，依次加入 100μl 蒸馏水，100μl 试剂三，混匀后置于 40℃水浴保温10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，记为A 空白管。

4. 标准管：取 0.5ml EP 管，依次加入 10μl 标准液，90μl 蒸馏水，100μl 试剂三，混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，记为A 标准管。

5. 测定管：取 0.5ml EP 管，依次加入 10μl 上清液，90μl 蒸馏水，100μl 试剂三，混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，记为A 测定管。

注意：空白管和标准管只需测定一次。

组织无机磷含量计算：

（1） 按照蛋白含量计算

无机磷含量(μmol/mg prot)= [C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V 总÷Cpr

=1×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷Cpr

（2） 按照样本质量计算

无机磷含量(μmol/g 鲜重 )= [C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V 总÷W

=1×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷W C 标准液：1mmol/L；V 总：上清液总体积，1ml=0.001 L；W：样品质量，g。

注意事项：

1. 试剂三需临用前配制，并且当天使用完毕。

2. 40min 内完成比色。

3. zui低检出限为 10μmol/L。

组织无机磷含量测定试剂盒   离子系列