原果胶含量试剂盒说明书

微量法 100T/48S

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

果胶是植物细胞壁主要组成成分之一，分为水溶性果胶和不溶性果胶，即原果胶。因其具有良好的乳化、增稠和凝胶作用，在食品、纺织、印染、烟草、冶金等领域具有较广泛的应用。

测定原理：

原果胶在稀酸中水解为可溶性果胶，并进一步转化为半乳糖醛酸，产物在强酸中与咔唑缩合生成紫红色化合物，在 530 nm 处有特征吸收峰。

原果胶含量试剂盒   果胶系列-常备现货

试剂的组成和配制：

自备仪器和用品：

天平、研钵、常温离心机、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、浓硫酸和蒸馏水。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

样品处理：

将组织样品捣碎，按照样品质量(g)和提取液一体积(ml)为 1: 20 的比列（建议取约 0.05g 样品，加入 1ml 提取液一），置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min，取出冷却后于 5000g、 25℃离心 10min，去掉上清，沉淀中再加入 1ml 提取液一重复操作一次，离心后去上清，沉淀中加入 1ml 提取液二，置于 90℃恒温水 浴锅中水解 1h，取出冷却后于 8000g、25℃离心 15min，取上清液待测。

测定操作表：

计算公式：

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

原果胶含量(mg /g 鲜重)= (C 标准×V 标) ×△A2÷△A1÷(W÷V 样总) = 0.25×△A2÷△A1÷W

C 标准：标准品浓度，0.25mg/ml；V 标：反应体系中加入标准品体积，0.02ml； V 样总：加入提取液体积，1ml；W：样本鲜重，g。

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

原果胶含量(mg /g 鲜重)= (C 标准×V 标) ×△A2÷△A1÷(W÷V 样总) =0.25×△A2÷△A1÷W

C 标准：标准品浓度，0.25mg/ml；V 标：反应体系中加入标准品体积，0.02ml； V 样总：加入提取液体积，1ml； W：样本鲜重，g。

注意事项：

1、空白管和标准管只需测定一次。

2、浓硫酸具有强腐蚀性，操作时需特别注意，90℃加热取出后冷却再打开盖子，以防液体飞溅烧伤。

3、若吸光值超过 1，可将样本提取液进行适当稀释再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。

4、zui低检出限为 10μg/g。

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