土壤纤维素酶（Solid-cellulase，S-CL）活性测定试剂盒说明书

微量法 100 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

S-CL 主要来源于土壤微生物，S-CL 催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。

测定原理：

采用蒽酮比色法测定S-CL 催化纤维素降解产生的还原糖的含量。

土壤纤维素酶活性测定试剂盒   土壤系列

试剂的组成和配制：

试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存； 临用前加入 5ml 蒸馏水和 45ml 浓硫酸充分溶解待用。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

自备仪器和用品：

酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96 孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸（不允许快递）和蒸馏水。

样品处理：

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。

加样表和测定步骤：

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 570nm，蒸馏水调零。

2、加样表(在 1.5ml 棕色EP 管中按下表依次加样）：

37℃振荡反应 3h 后，90℃水浴 15min（盖紧，防止水分散失），冷却后

8000g 25℃离心 10min，取上清，得糖化液

混匀， 90℃水浴 10min（盖紧，防止水分散失），冷却，取 200μl 至微量石英比色皿或 96 孔板中，测 620nm 下吸光值A，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。

S-CL 活力计算：

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 5.018x - 0.0462；x 为标准品浓度（mg/ml），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-CL 活力（mg/d/g）＝(ΔA+0.0462) ÷5.018×V 反总÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)

T：反应时间，3h=1/8d； V 反总：反应体系总体积：0.6ml；W：样本质量，0.05g。

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 2.5090x - 0.0462；x 为标准品浓度（mg/ml），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-CL 活力（mg/d/g）＝(ΔA+0.0462) ÷2.5090×V 反总÷W÷T =38.3×(ΔA+0.0462)

T：反应时间，3h=1/8d； V 反总：反应体系总体积：0.6ml；W：样本质量，0.05g。

土壤纤维素酶活性测定试剂盒   土壤系列