土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC)试剂盒说明书
微量法 100 管/48样
S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。
S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 510nm有特征光吸收,在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与S-SC 活性成正比。
产品名称 | BO6012-100T/48S | Storage |
试剂一:甲苯 | 1ml(自备) | 4℃ |
试剂二:液体 | 7.5ml | 4℃ |
试剂三:粉剂 | 1 瓶 | 4℃ |
试剂四:液体 | 22ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前每瓶加入 22ml 蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂 4℃保存;存一周;
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
风干土样(g) | 0.03 | 0.03 |
试剂一(μl) | 5 | 5 |
振荡混匀,使土样全部湿润,37℃水浴 15min |
试剂二(μl) | 75 | 75 | ||
试剂三(μl) | 220 | |||
蒸馏水(μl) | 220 |
充分混匀,放入 37℃水浴培养 24 小时,10000 g,4℃,离心 5min,取上清液
上清液(μl) | 85 | 85 |
试剂四(μl) | 215 | 215 |
充分混匀,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却,蒸馏水稀释 10 倍(可以吸取 100μl,加入 900μl 蒸馏水稀释;若吸光度大于 4,可以加大稀释倍数),取 200uL 至微量石英比色皿或 96 孔板中 510nm 处读吸光值A。计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。
标准条件下测定的回归方程为y = 4.9x -0.062;x 为标准品浓度(mg/ml),y 为吸光值。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个S-SC 活力单位。
S-SC 活力(mg/d/g 土样)=( ΔA+0.062) ÷4.9×10×V 反总÷W÷T =20.4×(ΔA+0.062)
10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V 反总:反应体系总体积:0.3ml;W:样本质量,0.03g。
标准条件下测定的回归方程为y = 2.45x -0.062;x 为标准品浓度(mg/ml),y 为吸光值。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个S-SC 活力单位。
S-SC 活力(mg/d/g 土样)=( ΔA+0.062) ÷2.45×10×V 反总÷W÷T =40.8×(ΔA+0.062)
10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V 反总:反应体系总体积:0.3ml;W:样品质量,0.03g。
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