土壤β-葡萄糖苷酶（Solid-β-Glucosidase，S-β-GC）试剂盒说明书

微量法 100 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

S-β-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

测定原理：

S-β-GC 能够催化对-硝基苯-β-D 吡喃葡萄糖苷生成对-硝基ben酚，后者在 400nm 有特征光吸收。

土壤β-葡萄糖苷酶试剂盒 土壤系列

试剂组成和配制：

试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前加入 10ml 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

自备仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

样品处理：

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。

测定步骤：

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 400nm，蒸馏水调零。

2、加样表。

混匀， 37℃振荡反应 1h 后，90℃水浴 5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却， 10000g 25℃离心 10min，取上清液（在EP 管或 96 孔板中加入下列试剂）

充分混匀，室温静置 2min 后， 400nm 处测定吸光值A，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设

一个对照管。

S-β-GC 活力计算：

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0032x -0.0027；x 为标准品浓度（μmol/L），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基ben酚定义为一个酶活力单位。

S-β-GC 活力（μmol/d/g 土样）＝ (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V 反总÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)

T：反应时间，1h=1/24d； V 反总：反应体系总体积：3×10^-4 L；W：样本质量，0.02g。

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.0027；x 为标准品浓度（μmol/L），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基ben酚定义为一个酶活力单位。

S-β-GC 活力（μmol/d/g 土样）＝ (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V 反总÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)

T：反应时间，1h=1/24d； V 反总：反应体系总体积：3×10^-4 L；W：样本质量，0.02g。

土壤β-葡萄糖苷酶试剂盒 土壤系列