土壤脲酶(Solid-Urease,S-UE)测定试剂盒说明书
微量法 100 管/48 样
S-UE 能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N。
产品名称 | BO6002-100T/48S | Storage |
试剂一:甲苯 | 2ml(自备) | 4℃ |
试剂二:粉剂 | 1 瓶 | -4℃ |
试剂三:液体 | 22ml | 4℃ |
试剂四:A 液 | 1 支 | 4℃ |
试剂四:B 液 | 1 瓶 | 4℃ |
试剂五:液体 | 2ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
试剂二:粉剂×1 瓶,临用前加入 9ml 蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的试剂 4℃保存;试剂四A 液:液体×1 支,4℃保存;试剂四B 液:液体×1 瓶,4℃保存;临用前将 A 液倒入 B 液中混合,待用;用不完的试剂 4℃保存一周。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
1 、培养
测定管 | 对照管 | |||
风干土样(g) | 0.05 | 0.05 | ||
试剂一(μl) | 20 | 20 | ||
振荡混匀,室温放置 15min | ||||
试剂二(μl) | 90 | |||
蒸馏水(μl) | 90 | |||
试剂三(μl) | 190 | 190 | ||
混匀,放入 37℃水浴培养 24h 后,10000g 25℃离心 10min,取上清液。 |
2、将培养结束的上清液稀释 10 倍(取 0.1ml 上清液,加入 0.9ml 蒸馏水)。
3、测氨量(在微量石英比色皿或 96 孔板中加入下列试剂):
测定管 | 对照管 | |
稀释后的上清液(μl) | 80 | 80 |
试剂四(μl) | 15 | 15 |
试剂五(μl) | 15 | 15 |
充分混匀,室温放置 20min | ||
蒸馏水(μl) | 90 | 90 |
混匀,于 578nm 处,蒸馏水调零,读吸光值 A,计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0915x +0.0373;x 为标准品浓度(μg/ml),y 为吸光值A。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。
脲酶活力(μg/d/g 土样)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反总÷W÷T =656×(ΔA -0.0373)
10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V 反总:反应体系总体积:0.3ml;W:样本质量,0.05g。
标准条件下测定的回归方程为y = 0.04575x +0.0373;x 为标准品浓度(μg/ml),y 为吸光值A。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。
脲酶活力(μg/d /g 土样)=(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V 反总÷W÷T =1312×(ΔA -0.0373)
10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V 反总:反应体系总体积:0.3ml;W:样本质量,0.05g。
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