总多糖含量测定试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

多糖是生物体中广泛存在的物质，是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物，它是生物体内重要的生物大分子，是维持生命活动正常运转的基本物质之一。

测定原理：

利用水提醇沉法提取总多糖，ben酚-硫酸法测定总多糖含量。

总多糖含量测定试剂盒 糖代谢系列-常备现货

组成：

自备仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

总多糖提取：

样本烘干粉碎，称取约 0.05g 样本，加入 1ml 水，充分匀浆。100℃水浴提取 2h（必须盖紧盖子防止水分流失），冷却后 10000g 离心 10min，取上清。吸取 0.2ml 上清，慢慢加入 0.8ml 无水乙醇，混匀后 4℃静置过夜，10000g 离心 10min，弃上清，沉淀中加入 1ml 水，充分混匀溶解沉淀。

测定步骤：

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 490nm，蒸馏水调零。

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2、吸取 400µl 上清，加入 200µl 试剂一和 1ml 浓硫酸，混匀后 90℃水浴 20min，流水冷却。取 1ml 加入比色皿，于 490nm 下测定吸光值A。

总多糖含量计算：

以葡萄糖作为对照品，标准条件下测定回归方程为y = 15.962x - 0.0037，R² = 0.9973，x 为葡萄糖含量（mg/ml），y 为吸光值。

总多糖含量(μg/g 干重)= (A +0.0037)÷ 15.962×V1÷V2×V3÷W×1000

=313.24×(A+0.0037) ÷W

V1：醇沉后重新溶解后的体积，1ml；V2：进行醇沉的体积，0.2ml；V3，提取时加入水的体积，1ml；W：样本质量，g；1000，mg 到μg 的换算系数。

总多糖含量测定试剂盒 糖代谢系列-常备现货