尿酸(Uric Acid, UA)含量测定试剂盒说明书
微量法 100T/96S
UA 是鸟类和爬行类动物的主要代谢产物,正常人体尿液中产物主要为尿素,含少量尿酸。此外,UA还是重要的抗氧化剂,能清除超氧化物,羟自由基等。体内UA 生成量和排泄量不平衡会导致多种疾病的发生。例如,血中UA 升高会引起痛风、肾功能损害和动脉硬化,相反UA 降低会引起恶性贫血,在临床诊断上具有重要的意义。
尿酸酶能催化UA 生成尿囊su,CO2 及H2O2,H2O2 氧化亚铁氰hua钾中的 Fe2+ 生成Fe3+ ,Fe3+进一步与酚和 4-氨基安替bi林缩合生成红色醌类化合物,在 505nm 下有特征吸收峰,测定反应体系 505nm的吸收值,可计算尿酸的含量。
产品名称 | BD6006-100T/96S | Storage |
缓冲液:液体 | 20ml | 4℃ |
试剂一:A 粉末 | 1 瓶 | 4℃避光 |
试剂一:B 粉末 | 1 瓶 | 4℃避光 |
试剂二:粉末 | 1 瓶 | 4℃避光 |
说明书 | 一份 |
试剂一:
A:用于标准管和测定管,粉剂 1 瓶,4℃避光保存,使用前加 13ml 缓冲液溶解。
B:用于空白管,粉剂 1 瓶,4℃避光保存,使用前加 7 ml 缓冲液溶解。
试剂二:粉剂 1 管,4℃避光保存,使用前加 2ml 蒸馏水溶解,60℃加热溶解。
恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。
1. 动植物组织:建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml 生理盐水或蒸馏水,进行冰浴匀浆,然后 8000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2. 血清,培养液:直接检测。
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 505nm。
2、操作表
标准管 | 空白管 | 测定管 | |
试剂一(μl) | A, 60 | B, 60 | A, 60 |
H2O(μl) | 180 | 240 | 180 |
试剂二(μl) | 60 | ||
样品(μl) | 60 | ||
混匀,37℃水浴 30min,取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板中,测定 505nm 处各管吸光值,标准管和空白管只需做一管。 |
1. 组织:
(1) 按样本重量计算
尿酸含量(μmol/g 鲜重)=C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷ (W÷V 样总)
=0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷ W
(2) 按样本蛋白浓度计算
尿酸含量(μmol/mg prot)=C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷ Cpr =0.5×(A
测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr
尿酸(μmol/L)= C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)×103
=500×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
C 标:标准品浓度 0.5μmol/ml;V 样总:加入提取液体积,1ml;W:样品质量,g ;Cpr:样本蛋白浓度,
mg/ml;103 :1μmol/ L=103μmol/ ml
1. 血清样本请在 24 小时内测定,或者 4℃密封避光保存不超过 72 小时。
2. 吸光值大于 0.8 可用蒸馏水稀释样本,并在计算公式中算入稀释倍数。
3. zui低检出限为 10μmol/L。
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