外泌体是由细胞分泌的包含 RNA 和蛋白质的小囊泡（30-150 nm），在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能，在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子；然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。
细胞上清外泌体提取试剂盒 常备现货

诺博莱德 细胞上清外泌体提取试剂盒

细胞上清外泌体提取试剂盒 常备现货

产品货号：P5098

产品名称：细胞上清外泌体提取试剂盒

产品规格：20T

产品简介：

中文名称：细胞上清外泌体提取试剂盒

规格：20T

储存条件：室温保存，有效期2年，使用前请充分混匀。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder P5098 细胞上清外泌体提取试剂盒

适用于细胞上清，可以提取400ml 细胞上清液

产品介绍

外泌体是由细胞分泌的包含 RNA 和蛋白质的小囊泡（30-150 nm），在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能，在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子；然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。

外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒，而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。生物自主开发的外泌体快速提取试剂盒，组分经过优化处理，适用于细胞培养上清液中的外泌体提取，并搭配纯化过滤装置，可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒，可用于电镜分析、NTA 粒径分析、核酸分析、蛋白分析、细胞学实验和动物实验等。

注：*无 RNA/DNA 酶，无菌。

自备材料：

高速离心机（可达到 10000×g 离心力）；涡旋振荡器；2mL 离心转子；1.5mL 离心管；1×PBS缓冲液（无菌）。

操作步骤：

1. 样品预处理

(1) 取样：如果是冻存样品，从冰箱取出后于 25℃水浴中进行解冻，将wan全融化后的样品置于冰上；如果是新鲜样品，收集样品后置于冰上。

(2) 样品初始用量：单次提取时的细胞培养上清液的用量最少为 20mL。

(3) 离心去细胞碎片：将样品转移至离心管中，于 4℃以 3000×g（~5200rmp）离心 10min，去除样品中的细胞碎片

（注：若沉淀较多，可 3000×g/10min 离心多次至无明显沉淀，每次取离心上清液）。

(4) 上清液转移：去除细胞碎片的离心上清液转移到新的 50mL 离心管中。

2. 提取外泌体

(1) 上清液预处理：在去除杂质的离心上清液中加入 Exosome Concentration Solution（ECS 试剂），具体的加入剂量如下：（其他剂量请根据表中的试剂用量等比例换算）。

(2) 溶液混合：加入 ECS 试剂后将离心管盖紧，通过涡旋振荡器混匀 1min，再放置于 4℃静置至少 2h（增加静置时间可提高外泌体得率，但静置时间不可超过 24h）。

(3) 沉淀外泌体：取出装有混合液的离心管于 4℃以 10000×g（~9500rmp）离心 60min，弃上清，沉淀中富含外泌体颗粒（注：尽可能吸净上清液）。

(4) 外泌体重悬：取 1×PBS 均匀吹打离心沉淀物（具体加入剂量如下表），待其溶解后，将重悬液转移至新的 1.5mL 离心管中（注：其他剂量请根据表中的试剂用量等比例换算）。

(5) 收集外泌体颗粒：将含有重悬液的 1.5mL 离心管于 4℃以 12000×g（~12400rmp）离心 2min，保留上清液，该上清液中富含外泌体颗粒（注：若沉淀较多，可 12000×g /2min 离心多次至无明显沉淀，每次取离心上清液）。

3. 纯化外泌体

(1) 纯化外泌体：将收获的外泌体颗粒粗品转入 Exosome Purification Filter（EPF 柱）上室中，于 4℃以 3000×g（~6200rmp）离心 10min，离心后收集 EPF 柱管底的液体，此液体即为纯化后的外泌体颗粒（注：EPF 柱不可重复使用）。

(2) 外泌体的保存：纯化后的外泌体以 50-100μL 进行分装保存于-80℃低温冰箱中，以备后继实验使用。

注意事项：

本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途。

细胞上清外泌体提取试剂盒 常备现货

产品订购信息：

P5098  细胞上清外泌体提取试剂盒  20T