诺博莱德 柱式超纯快速植物RNA小提试剂盒 Spin HiPure Fast Plant RNA Mini Kit
柱式超纯快速植物RNA小提试剂盒 质粒提取
产品货号:R0858
产品名称:柱式超纯快速植物RNA小提试剂盒 Spin HiPure Fast Plant RNA Mini Kit
英文名称:Spin HiPure Fast Plant RNA Mini Kit
产品规格:50T
产品简介:
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyderR0858 柱式超纯快速植物RNA小提试剂盒 Spin HiPure Fast Plant RNA Mini Kit本产品采用了du特的裂解系统,无需使用β-巯基乙醇、ben酚、氯仿等有毒试剂,适合各种简单植物组织材料(如叶片、茎、幼 苗等)的RNA提取,操作快速,可有效提取分子量大于200nt的RNA。利用该试剂盒提取的植物RNA纯度高,极少含蛋白质、 基因组DNA和其它杂质的污染;可直接用于RT-PCR、Northernblot、RealTime PCR、构建cDNA 文库等各种下游实验。
实验准备:
1. RNase-free DNase 母液的配制:用1mLRNase-free 注射器抽取550µLRNase-freeddH2O,打进装有RNasefreeDNase(2000U)干粉的玻璃瓶中,轻柔混匀,分装后-20℃保存(可保存9个月)。
注:从-20℃ 融化后的 RNase-freeDNase母液保存于4℃(可保存6周),不要再次冻存。
2. 使用前请先在漂洗液2(WB2)中按瓶标加入无水乙醇,并做好标记。
操作步骤:
1.取450µL裂解液加入到1.5mLRNase-free离心管中。
2.组织样品经液氮研磨后,将研磨成粉末状的样品(50-100mg)加入到上述含有450µL裂解液的1.5mL离心管中,涡旋剧烈震荡混匀直至裂解液中无明显沉淀。
注 :在60℃孵育1-3min将有助于植物组织裂解,但是对于某些富含淀粉的样品,请不要加热处理,防止因淀粉引起的样品膨胀。
3.将过滤柱放入收集管中,然后将步骤2中所有的溶液用移液器转移至过滤柱中,12000rpm离心5min,小心吸取收集管中的滤液至新的1.5mLRNase-free离心管中,吸头尽量避免触及收集管中的细胞碎片沉淀。
注 :由于裂解液较粘稠,所以将溶液转移至过滤柱时,可以剪去部分吸头末端
4.缓慢加入0.5倍滤液体积的无水乙醇,上下颠倒混匀(此时可能会出现沉淀),将得到的溶液和沉淀一起转入离心吸附柱(吸附柱放在收集管中),12000rpm离心30s,弃除收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
5.向吸附柱中加入350µL漂洗液1(WB1),12000rpm离心30s,弃除收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
6.RNase-free DNase 工作液的配制:取10µLRNase-freeDNase 母液放入新的RNase-free离心管中,加入70µL膜反应液,轻柔混匀。
注 :解冻后的RNase-freeDNase母液保存于4℃(可保存6周),避免反复冻融。
7.向吸附柱中央加入80µLRNase-freeDNase工作液,室温放置15min。
8.向吸附柱中加入350µL漂洗液1(WB1),12000rpm离心30s,弃除收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
9.向吸附柱中加入500µL漂洗液2(WB2)(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm 离心30s,弃除收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
10.重复操作步骤9一次。
11.将吸附柱放回收集管中,12000rpm离心3min,此步骤十分重要,否则残留的乙醇(漂洗液2(WB2)中的成分)会影响RNA的使用。
12.将吸附柱放入一个新的1.5mLRNase-free离心管中,加入50-100µLRNase-freedd H2O,室温放置1-2min,12000rpm离心1min,得到RNA溶液。所得RNA溶液应立即使用或适量分装后存放于-80℃待用。
注意事项:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
柱式超纯快速植物RNA小提试剂盒 质粒提取
产品订购信息
R0858 柱式超纯快速植物RNA小提试剂盒 Spin HiPure Fast Plant RNA Mini Kit 50T
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