本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和du特的缓冲液系统，提取酵母基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司te有新型材料，能够高效专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。
酵母基因组DNA提qu试剂盒 质粒提取

诺博莱德  酵母基因组DNA提qu试剂盒 Yeast Genomic DNA Extraction Kit

酵母基因组DNA提qu试剂盒 质粒提取

产品货号：D9788

产品名称：酵母基因组DNA提qu试剂盒 Yeast Genomic DNA Extraction Kit

英文名称：Yeast Genomic DNA Extraction Kit

产品规格：50T/100T

产品简介：

储存条件：酶附件-20℃，其它试剂RT，复检期1年

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

 NobleRyderD9788  酵母基因组DNA提qu试剂盒本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和du特的缓冲液系统，提取酵母基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司te有新型材料，能够高效专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、 PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

操作步骤：

1. 取酵母细胞（不超过5×107cells），8000rpm离心1min，尽量吸除上清。

注意：过夜培养酵母菌液OD值为2.0左右，离心收集菌体，用PBS洗涤尽量去除培养基。

2. 酵母细胞壁的破除：向酵母菌体中加入470μL山li醇Buffer。充分悬浮菌体，加入25μL酵母破壁酶和5μL巯基还原剂，充分混匀。30℃处理1-2h，期间可颠倒离心管混匀数次。

3. 12000rpm 离心1min，弃上清，收集沉淀。

4. 向沉淀中加入300μL溶液A，充分悬浮沉淀，向悬浮液中加入2μLRNaseA，充分颠倒混匀，室温放置10min。

5. 加入220μL溶液B，再加入20μL的蛋bai酶K，充分颠倒混匀，65℃水浴消化15-30min，消化期间可颠倒离心管混匀数次。

6. 8000rpm 离心30s，取上清。（尽快吸出，温度降至室温后会出现白色浑浊液体）

7. 冷却至室温，加入375μL无水乙醇，混匀后，将液体加入吸附柱中，8000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

8. 向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前请先检查是否己加入无水乙醇)。12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

9. 向吸附柱中加入600μL漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

10. 12000rpm 离心 2min，将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后续实验如酶切、PCR等。

11. 将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50-200μL经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置5min，12000rpm离心1min。

12. 离心所得脱液再加入吸附柱中，12000rpm离心2min，即可得到高质量的基因组DNA。

注意事项：

1.样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。

 2.若试剂盒中的溶液出现沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影响提取效果。

 3.如果实验中的离心步骤出现柱子堵塞的情况，可适当延长离心时间。

 4.洗脱缓冲液的体积最好不少于50μL，体积过小会影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围)，pH值低于7.0会降低洗脱效率。DNA产物保存在-20℃，以防DNA降解。

酵母基因组DNA提qu试剂盒 质粒提取

产品订购信息

D9788  酵母基因组DNA提qu试剂盒 Yeast Genomic DNA Extraction Kit  50T/100T