NobleRyderD9038 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒 Poly-Gel DNA Extraction Kit
聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒 质粒提取
产品货号:D9038
产品名称:聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒 Poly-Gel DNA Extraction Kit
英文名称:Poly-Gel DNA Extraction Kit
产品规格:20T/50T
产品简介:
储存条件:RT,复检期1年
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyderD9038 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和du特的缓冲液系统,从聚丙烯酰胺凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒回收的DNA可适用于后续各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
操作步骤(仅供参考):
第一次使用前请先在15mL漂洗液中加入60mL无水乙醇,所有离心步骤均可使用台式离心机在室温下离心。
1.将单一的目的DNA条带从聚丙烯酰胺凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入1.5mL离心管中,称取重量,用研磨杵将胶尽量挤压碎。加入2倍体积的溶液A吹打混匀(每100mg胶加入200μL溶液A),75℃水浴30min。
2.用 1mL 的去尖吸头吸取混合物至过滤柱中(将胶一起吸入,溶液过多时可分次加入),13,000rpm 离心 1min。将收集管中的滤出液转入新离心管中。
3.取 6倍体积溶液B加入原离心管中(每100mg胶加入600μL),清洗管壁后加入过滤柱中(溶液过多时可分次加入),颠倒过滤柱或轻轻吹打几次混匀,13,000rpm离心1min。将所有收集的滤出液混合。
4.将总滤出液混匀后加入吸附柱中(溶液过多时可分次加入),13,000rpm离心30-60s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。
5.向吸附柱中加入 600μL 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),13,000rpm 离心
30-60s,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。
6.向吸附柱中加入600μL漂洗液,13,000rpm离心30-60s,倒掉废液。
7.将离心吸附柱放回收集管中,13,000rpm 离心 2min,尽量除去漂洗液。将吸附柱开盖置于室温1-2min,che底晾干,以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
8.将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量65–70℃预热的洗脱缓冲液20-30μL,室温放置2min。13,000rpm 离心 2min 收集 DNA 溶液。注意:①为了增加回收效率,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,13,000rpm 再次离心 1min。②洗脱缓冲液体积不应少于20μL,体积过小影响回收效率。③洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若
用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。
9.DNA 回收产物直接后续实验或者-20℃保存。
注意事项:
1.电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2.切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
3.本试剂盒对<50bp DNA片段回收效率偏低(30%左右),如要回收,应加大结合液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
4.回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒 质粒提取
产品订购信息
D9038 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒 Poly-Gel DNA Extraction Kit 20T/50T
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