脂蛋白酯酶（Lipoprotein lipase，LPL）试剂盒说明书

分光光度法 50 管/24 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶，可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯，以供组织氧化供能和贮存，并在不同的组织表现出不同的生理意义。

测定原理：

脂蛋白酯酶水解 4-硝基苯棕榈酸酯产生 4-硝基ben酚，在 400nm 有特征吸收峰。

脂蛋白酶试剂盒   脂肪酸系列-常备现货

组成：

自备仪器和用品：

天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

样品处理：

1. 组织：按照质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1ml 试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清待测。

2. 细胞：按照细胞数量（10⁴ 个）：试剂一体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1ml试剂一）加入试剂一，冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清待测。

3. 血清：直接测定。

测定操作：

计算公式：

标准曲线：y= 0.0581x -0.0169，R²=0.9982

1. 按照蛋白浓度计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每毫克蛋白每分钟水解产生 1μmol 4-硝基ben酚为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.0581×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷Cpr

2. 按照样本质量计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每克组织每分钟水解产生 1μmol 4-硝基ben酚为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min /g 鲜重）=（△A+0.0169）÷0.0581×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷W

3. 按照细胞数量计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每 104 个细胞每分钟水解产生 1μmol 4-硝基ben酚为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min /10⁴ cell）= （△A+0.0169）÷0.0581×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T= 17.21×（△A+0.0169）÷细胞数量

4. 按照液体体积计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每毫升血清每分钟水解产生 1μmol 4-硝基ben酚为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min /ml）=（△A+0.0169）÷0.0581×V 反总÷V 样÷T

= 17.21×（△A+0.0169）

V 反总：反应总体积，1ml；V 样：反应体系中加入样本体积，0.1ml；W：样本质量，g；V 样总：加入提取液体积，1ml；T：反应时间，10min

注意事项：

1. 试剂三加入混匀后静置两分钟立即测定，否则影响吸光值。

2. 吸光值过高或者测定结果不稳定，则将酶液进行适当的稀释，并在计算公式中乘以稀释倍数。

脂蛋白酶试剂盒   脂肪酸系列-常备现货