木质素（Lignin）含量试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

木质素是构成植物细胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇构成的一类物质，存在于木质组织中，主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁。木质素主要位于纤维素纤维之间，起抗压作用。

测定原理：

木质素中的酚羟基发生乙酰化后在 280nm 处有特征吸收峰，280nm 的吸光值高低与木质素含量正相关。

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试剂组成和配制：

需自备仪器和用品：

天平、40 目筛，玻璃试管、烧杯、离心机，恒温水浴锅、烘箱、封口膜、紫外分光光度计、1ml 石英比色皿、高氯酸，浓硫酸。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

样品处理：

样品 80℃烘干至恒重，粉碎，过 40 目筛，称取约 5mg（记为W）于 10ml 玻璃试管中（务bi用玻璃试管，不可用Ep 管）。

测定步骤：

于 10ml 玻璃试管中，用封口膜密封，充分混匀，80℃水浴 40min，每隔 10min 震荡一次，然后自然冷却：

充分混匀

取 1ml 于石英比色皿，测定 280nm 处吸光值A。分别记为A 空白管和A 测定管，ΔA=A 测定管-A 空白管

计算公式：

标准曲线：y = 0.0694x+0.0068，R2=0.9889

Lignin（mg/g 干重）= (ΔA-0.0068)÷0.0694×V 反总×10-3÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068) ÷W×T

V 反总：反应总体积：2.04ml；W：样本质量，g；T：稀释倍数

注意事项：

1、试剂一有毒性，请操作时做好防护措施，加热前必须用封口膜密封，以防气体溢出。

2、加热过程中有剧烈反应，震荡时轻摇，以免压力过大喷出造成人生伤害。

3、试剂三具有强刺激性，建议操作过程全部在通风橱子操作。

4、取上清加试剂三步骤根据自己样品乙酰化程度，试剂三的用量可调整，保证吸光值在 0.1-0.8 之间即可，并在公式中参与计算。

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