甜菜碱(Betaine)含量试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
甜菜碱是一种广泛分布于动植物及微生物体内的季铵型水溶性生物碱,是生物体内dan碱的氧化产物,可以增强免疫力、降血脂、抗氧化、抗肿瘤,并可作为甲基供体,参与促进动物蛋白质和脂肪代谢、增进食欲、缓和应激、调节渗透压、稳定维生素等多种生物作用,在化工、医药、食品添加剂等领域有较广泛的应用。
甜菜碱在强酸条件下和雷氏盐发生反应产生沉淀,沉淀用丙酮溶解形成红色溶液,在 525nm 处有特征吸收峰,测定 525nm 处的吸光值,可计算得样品的甜菜碱含量。
产品名称 | BP6023-50T/48S | Storage |
提取液:液体 | 30ml | 4℃ |
试剂一:粉剂 | 3 瓶 | 4℃ |
试剂二:99%yi醚,自备 | -- | -- |
试剂三:70%丙酮,自备 | -- | -- |
说明书 | 一份 |
试剂一:粉剂 3 瓶,4℃保存,临用前根据用量配制,每瓶加 40ml 蒸馏水溶解,加 780µl 浓盐酸调pH 为1。
试剂二:99%yi醚,自备。取无水yi醚 99ml,加入蒸馏水 1ml,混匀。
试剂三:70%丙酮,自备。(易挥发,根据用量自备,丙酮:蒸馏水=7:3)。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
天平、离心机、可见分光光度计、1ml 玻璃比色皿、yi醚、盐酸、丙酮和蒸馏水。
1、分光光度计预热 30min,调节波长至 525nm。
2、操作表
标准管 | 测定管 | |||||||
上清液(µl) | 1200 | |||||||
蒸馏水(µl) | 1200 | |||||||
试剂一(µl) | 2000 | 2000 | ||||||
充分混匀,4℃中反应 2h,12000rpm,25℃,离心 10min,弃上清 | ||||||||
试剂二(µl) | 2000 | 2000 | ||||||
混匀,12000rpm,25℃,离心 10min,弃上清。置于通风橱使残余yi醚自然挥发 干净 | ||||||||
试剂三(µl) | 1200 | 1200 | ||||||
震荡使沉淀充分溶解,取 1ml 于 1ml 玻璃比色皿,试剂三调零,记录标准管和测 定管 525nm 处吸光值A 测定与A 空白。ΔA=A 测定管-A 空白管。 |
标准条件下测定的回归方程为y = 1.004x + 0.0057,R2 = 0.9993;x 为甜菜碱浓度(mg/ml),y 为吸光值。甜菜碱含量(mg/g 干重)=(ΔA-0.0057)÷1.004× V 标准÷(V 样÷V 样总×W)
=1.99×(ΔA-0.0057)÷W
V 标准:标准品体积,1.2ml;V 样:反应中样本体积,1.2ml;V 样总:加入提取液体积,2ml;W:样本质量,g
1、试剂一配制时pH 严格控制为 1,否则会导致反应不wan全,配制后 4℃只能稳定几个小时,配制后尽快使用。
2、试剂二与试剂三对呼吸道有一定的刺激,请做好防护工作。
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