土壤谷an酰胺酶(solid-glutaminase, S- GLS) 活性测定试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

GLS（EC 3.5.1.2）存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷an酰胺水解成谷an酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。

测定原理：

S-GLS 催化谷an酰胺水解成 L-谷an酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。

土壤谷an酰胺酶活性测定试剂盒-常备现货

试剂组成和配制：

自备仪器和用品：

台式离心机、可见分光光度计、1ml 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、甲苯、冰和双蒸水。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

测定步骤：

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 420nm，蒸馏水调零。

2、样品测定（在 EP 管中加入下列试剂）；

振荡混匀，室温放置 15min；

混匀，37℃水浴 2 小时

混匀，8000 g，25℃离心 10 min；取上清液，依次加入下列试剂

注意事项:

混匀，室温静置 15min，420nm 处读取测定管和对照管吸光值，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。对照管只要做一管。

试剂六如出现沉淀，静置后取上清使用。

酶活性计算：

标准条件下测定的回归方程为y = 3.8488x +0.0057；x 为标准品浓度（μmol/ml），y 为吸光值A。单位定义：每 g 土样每min 催化谷an酰胺生成 1nmol 氨定义为一个酶活力单位。

S-GLS（nmol/min/g 土样）=(ΔA-0.0057)÷3.8488×V 反总÷W÷T×1000

=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。

V 反总：反应体系总体积：1.05ml；T：反应时间，2h=120min；W：样本质量，g; 1000，μmol 到nmol换算系数。

土壤谷an酰胺酶活性测定试剂盒-常备现货