土壤谷an酰胺酶(solid-glutaminase, S- GLS) 活性测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
GLS(EC 3.5.1.2)存在于高等动物和某些细菌以及植物根中,催化谷an酰胺水解成谷an酸和氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
S-GLS 催化谷an酰胺水解成 L-谷an酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。
产品名称 | BO6036-50T/48S | Storage |
试剂一:液体 | 8ml | 4℃ |
试剂二:液体 | 20ml | 4℃ |
试剂三:液体 | 30ml | 常温 |
试剂四:液体 | 10ml | 常温 |
试剂五:液体 | 6ml | 常温 |
试剂六:液体 | 6ml | 常温避光 |
说明书 | 一份 |
自备仪器和用品:
台式离心机、可见分光光度计、1ml 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、甲苯、冰和双蒸水。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 420nm,蒸馏水调零。
2、样品测定(在 EP 管中加入下列试剂);
试剂名称(μl) | 测定管 | 对照管 |
样本 | 0.1 | |
甲苯 | 25 | 25 |
振荡混匀,室温放置 15min;
试剂一 | 100 | 100 |
试剂二 | 400 | 400 |
混匀,37℃水浴 2 小时
试剂三 | 525 | 525 |
混匀,8000 g,25℃离心 10 min;取上清液,依次加入下列试剂
上清液 | 650 | 650 |
试剂四 | 150 | 150 |
试剂五 | 100 | 100 |
试剂六 | 100 | 100 |
混匀,室温静置 15min,420nm 处读取测定管和对照管吸光值,计算ΔA=A 测定管-A 对照管。对照管只要做一管。
试剂六如出现沉淀,静置后取上清使用。
标准条件下测定的回归方程为y = 3.8488x +0.0057;x 为标准品浓度(μmol/ml),y 为吸光值A。单位定义:每 g 土样每min 催化谷an酰胺生成 1nmol 氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS(nmol/min/g 土样)=(ΔA-0.0057)÷3.8488×V 反总÷W÷T×1000
=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。
V 反总:反应体系总体积:1.05ml;T:反应时间,2h=120min;W:样本质量,g; 1000,μmol 到nmol换算系数。
电话
微信扫一扫