土壤脂肪酶(Solid-Lipase,S-LPS)活性试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
LPS 又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS 广泛的存在于各种生物中。血清中 LPS 的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。
LPS 催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算 LPS 活性。
产品名称 | BO6034-50T/48S | Storage |
试剂一:液体 | 90ml | 4℃ |
试剂二:粉剂 | 14ml | 4℃ |
试剂三:甲苯 | 100ml(自备) | 4℃ |
试剂四:粉剂 | 20ml | 4℃ |
标准品:液体 | 10μl | 4℃ |
说明书 | 一份 |
试剂二:液体 14ml×1 瓶,4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡 20min;
标准品:液体 10μl×1 瓶,10 µmol/ml 的标准溶液,4℃保存。临用前加入 3.168 ml 甲苯,充分溶解。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1ml 玻璃比色皿、可调式移液枪、甲苯 100ml、冰和蒸馏水。
建议称取约 0.1g 土样,加入 1ml 试剂一进行冰浴匀浆,再用回旋式振荡器振荡提取 15min,4℃,4000g离心 10min,取上清待测。
1、分光光度计预热 30 min 以上,调节波长到 710 nm,蒸馏水调零。
2、试剂一和试剂二置于 37℃水浴预热 30min 以上。
3、在 5ml EP 管中依次加入下列试剂:
试剂名称(μl) | 空白管 | 测定管 | ||
蒸馏水 | 375 | |||
样本 | 125 | |||
试剂一 | 750 | 750 | ||
试剂二 | 250 |
37℃振荡反应 10 min;
试剂三 | 2000 | 2000 |
37℃振荡反应 10 min 后,8000g,25℃,离心 10min,取上清液
试剂名称(μl) | 空白管 | 测定管 | 标准管 |
上清液 | 1200 | 1200 | |
标准品 | 1200 | ||
试剂四 | 300 | 300 | 300 |
37℃振荡反应 5 min 后,静置 5min,取 800μl 上层液加入 1 ml 玻璃比色皿,于 710nm 处测定吸光值。
空白管和标准管只需测定一次。
活性单位定义:37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成 1μmol 脂肪酸为一个酶活单位。
S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管- A 空白管)]×V 反总÷(W×V样÷V 样总)÷T=16×[(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管- A 空白管)]÷W
C 标准品:10 µmol/ml;V 反总:反应总体积,2ml;V 样:反应中加入样本体积,0.125ml;V 样总:加入提取液体积,1ml;W:样本质量,g;T:催化反应时间,10 min。
电话
微信扫一扫