土壤脂肪酶（Solid-Lipase，S-LPS）活性试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

LPS 又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS 广泛的存在于各种生物中。血清中 LPS 的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

测定原理：

LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算 LPS 活性。

土壤脂肪酶活性试剂盒   土壤系列-常备现货

试剂组成和配制：

试剂二：液体 14ml×1 瓶，4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡 20min;

标准品：液体 10μl×1 瓶，10 µmol/ml 的标准溶液，4℃保存。临用前加入 3.168 ml 甲苯，充分溶解。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

自备仪器和用品：

研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1ml 玻璃比色皿、可调式移液枪、甲苯 100ml、冰和蒸馏水。

样本处理：

建议称取约 0.1g 土样，加入 1ml 试剂一进行冰浴匀浆，再用回旋式振荡器振荡提取 15min，4℃，4000g离心 10min，取上清待测。

S-LPS 测定操作：

1、分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 710 nm，蒸馏水调零。

2、试剂一和试剂二置于 37℃水浴预热 30min 以上。

3、在 5ml EP 管中依次加入下列试剂：

37℃振荡反应 10 min；

37℃振荡反应 10 min 后，8000g，25℃，离心 10min，取上清液

37℃振荡反应 5 min 后，静置 5min，取 800μl 上层液加入 1 ml 玻璃比色皿，于 710nm 处测定吸光值。

注意事项:

空白管和标准管只需测定一次。

S-LPS 活性计算公式：

活性单位定义：37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成 1μmol 脂肪酸为一个酶活单位。

S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]×V 反总÷（W×V样÷V 样总）÷T=16×[(A 测定管－A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]÷W

C 标准品：10 µmol/ml；V 反总：反应总体积，2ml；V 样：反应中加入样本体积，0.125ml；V 样总：加入提取液体积，1ml；W：样本质量，g；T：催化反应时间，10 min。

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