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小量全血基因组DNA快速 ti取试ji盒核酸提取
简要描述:

适用于从新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液样本中快速提取高质量的基因组DNA,也可以提取白膜层和血凝块。
小量全血基因组DNA快速 ti取试ji盒核酸提取

  • 产品型号:40011
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2025-04-21
  • 访  问  量:82
详情介绍

FlashPure Blood Genomic DNA Kit

血液基因组 DNA ti取试剂盒

(离心柱型)

 

小量全血基因组DNA快速 ti取试ji盒核酸提取

 

目录号:40110

产品内容:

产品成分

40110-5050 

40110-100100 

平衡液

5ml

10ml

缓冲液 BB

10ml

20ml

结合液 CB

11ml

20ml

抑制物去除液IR

25ml

50ml

漂洗液WB

13ml

25ml

洗脱缓冲液 EB

10ml

15ml

蛋白mei K 溶液

1ml

2x 1 ml

DNA 吸附柱和收集管

50

100

10x 红细胞裂解液(赠送

10ml

20ml

自备试剂:

无水乙chunRNase A(可选

保存条件:

室温(15~25℃)

蛋白mei K,室温可保存 6 个月,4℃保存 12 个月,~ 20℃保存 2 年。

 

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准 

 

产品简介:

适用于从新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液样本中快速提取高质量的基因组DNA,也可以提取白膜层和血凝块。

本试剂盒采用du特的裂解液,利用硅胶膜特异吸附DNA,无需fenlv仿等有毒试剂,也无需进行耗时的chun类沉淀,最大限度的去除蛋白及其他抑制性杂质,得到基因组DNA,无蛋白、核酸mei污染,可直接进行PCRmei切和杂交等相关分子生物学实验。

产品特点:  

1.         简便快速:30 min 内可获得高纯度的基因组 DNA

2.         安全无毒:无需苯fen/lv仿抽提。

3.         高产:典型的产量 200µl 全血可提取出 36µg 基因组 DNA

4.         高纯:OD260/280=1.71.9,长度可达 3050 kb,可直接进行 PCRmei切和杂交等分子生物学实验。

注意事项:

1.         如果结合液CB、抑制物去除液IR有沉淀析出,可在37℃水浴溶解,摇匀后使用。

2.         开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。

3. 为了最jiaxiao果,最hao使用新鲜血液标本或者4℃存放少于3天的标本,不要使用反复冻融超过3次的标本,否则会严重降低产量。

4. 不同样品尤其疾病样品中白细胞数量差异可能非常大,因此产量的个体差异也可能非常大。

5.         洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游mei切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保批pH大于7.5 pH过低影响洗脱效率。用水洗脱 DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱

10mM Tris-HCl 1mM EDTApH 8.0),但是EDTA可能下游mei切反应,使用时可以适当稀释

操作步骤:

第一次使用前,请先在漂洗液 WB 中加入zhi定量无水乙chun,详见瓶身的标签。提示:所有离心步骤必须在室温(15~25℃)下进行。

1.         柱平衡:向吸附柱的膜中央(吸附柱放入收集管中加入 100μ平衡液,12,000 rpm 离心 1 min,弃滤液,将吸附柱重新放回收集管中。(请使用当天处理过的柱子

2.  200 μ新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液,放入 1.5 ml 离心管。

如果血液起始量小于200 μl,则用1× PBS补足到200 μl

如果起始量介于200μl-300μl之间,则需要按照比例增加试剂用量。

如果起始量介于300 μl~1 ml之间,则需要先进行红细胞裂解操作: 10x 红细胞裂解液用灭菌水稀释到1x,然后在样品中加入3倍体积的1x红细胞裂解液,颠倒混匀,室温放置10 min,期间再颠倒混匀几次。 13,000 rpm离心20 sec(对于1.5 ml离心管)2,000 ~ 3,000 rpm离心5 min(对于15 ml离心管),吸去上清,留下白细胞沉淀(如果看到的是大部分的红色细胞团,则再次加入31x红细胞裂解液,重复裂解一次,加入200 μl 1× PBS,振荡至che底悬浮。

提取凝固血时需要在操作前用枪头捣碎血凝块后按照正常步骤进行。

如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量仅用5 ~ 20 μl,可加1× PBS 补足到200 μl后,进行下面的裂解步骤。

3.       (可选,一般不需要)如果需要去除 RNA,可向 200 μl 的血液样品中加入 5 μl RNase A (100mg/ml溶液,振荡混匀,室温放置 5 ~ 10 min

4.        加入 20 μ蛋白mei溶液,充分振荡混匀。

5.       加入 200 μ结合液 CB,充分振荡混匀,70℃放置 10 min,期间颠倒混匀几次,溶液应该变清亮,但颜色偏黑如果未变清亮,请延长时间

6.       冷却后加 100 μl 无水乙chun (或异丙chun),充分振荡混匀,此时可能会出现絮状沉淀,短暂离心以去除管盖内壁水珠。

7.       将所得溶液和絮状沉淀加入一个DNA 吸附柱中(吸附柱放入收集管中

13, 000 rpm 离心 1 minDNA 被吸附在膜上,倒弃滤液。

8.        加入 500 μ抑制物去除液 IR13, 000 rpm 离心 30 sec,倒弃滤液。

9.        加入 600 μ漂洗液 WB(请检查是否已加入无水乙chun13, 000 rpm

离心 30 sec,倒弃滤液。

10.     重复步骤 9 一遍。

11.      DNA 吸附柱放回空收集管中,13, 000 rpm 离心 2 min,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙chun抑制下游反应。

12.     取出 DNA 吸附柱,放入一个干净的 1.5 ml 离心管中,向吸附膜的中央加入 100 μ洗脱缓冲液 EB 洗脱缓冲液事先在 80 ~ 100℃水浴中预热可以提高产量, 室温放置 3 ~ 5 min13, 000 rpm 离心 1 min

可将第一次洗脱所得的 DNA 溶液重新加入离心柱中,室温放置 2 min 13, 000 rpm 离心 1 min。可以提高浓度 10%左右。

13.     DNA 可以存放在 2~8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。

 

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小量全血基因组DNA快速 ti取试ji盒核酸提取

 


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