诺博莱德 丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit
丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 抗逆系列
产品货号:BC8808
产品名称:丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit
产品规格:50T/48S
产品简介:
中文名称:丙二醛(MDA)含量检测试剂盒
英文名称:Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit
规格:50T/48S
检测方法:可见分光光度法 Spectrophotometer
储存条件:Store at 2-8℃,6 months
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder BC8808丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括丙二醛(MDA)。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。
丙二醛(MDA)在酸性和高温条件下,可以与硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成棕红色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑-2,4-er酮),其最大吸收波长在532nm。进行比色后可估测样本中MDA的含量。
产品说明:
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化,脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括丙二醛(MDA)。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。
丙二醛(MDA)在酸性和高温条件下,可以与硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成棕红色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑-2,4-er酮),其最大吸收波长在532nm。进行比色后可估测样本中MDA的含量。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、细菌、细胞样本的制备:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率200W,超声3s,间隔10s,重复30次):8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织样本的制备:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆:8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆):直接检测。
4、高脂血或者油脂类样本:取40μL样本和80μL无水乙醇混合(即样本被稀释3倍),涡旋震荡5min后使用。不同高脂肪类样本可能会有不同的稀释倍数,可以稀释不同倍数进行预实验以确定最佳稀释倍数。同时操作表中空白管的蒸馏水应以(66μL蒸馏水+134μL乙醇)代替。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上,蒸馏水调零。
三、MDA含量计算
(1)按照蛋白浓度计算
MDA含量(nmol/mg prot) =[ΔAxV 反总÷ (εxd) x10°]+(CprxV 样本) xF =32.258xΔA+CprxF
(2)按照样本质量计算
MDA含量(nmol/g质量)=[ΔAxV 反总+(εxd) x10]+(WxV 样本+V 提取) xF=32.258xΔA+WxF
(3)按照细菌或细胞数量计算
MDA含量(nmol/10*cell) =[ΔAxV 反总÷ (exd) x10°]+(NxV 样本÷V 提取) xF = 32.258x△A÷NxF
(4)按照体积计算
MDA含量(nmol/mL)=[ΔAxV 反总÷ (exd) x10]+V 样本xF =32.258x△AxF
V反总:反应体系总体积,0.001L;s:MDA摩尔吸光系数,1.55x105L/mol/cm:V样本:加入样本体积,0.2mL;d:比色皿光径,1cm;V提取:加入提取液体积,1mL:Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL:W:样本质量,g;N:细胞或细菌总数,以万计:109:单位换算系数,1mol=10°nmol:F:稀释倍数,高脂血或者油脂类样本需乘以稀释倍数。
注意事项:
若发现检测样本吸光值过低,可以将沸水浴时间60min调整为90min或者更长,但同一实验中的MDA的检测都需要延长到同一时间以免引起误差。
丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 抗逆系列
产品订购信息:
BC8808丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit 50T/48S
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