生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用，但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用，导致机体细胞和组织代谢异常，从而引起多种疾病。
超氧阴离子含量检测试剂盒 抗逆系列

诺博莱德 超氧阴离子含量检测试剂盒 Superoxide Anion Activity Content Assay Kit

超氧阴离子含量检测试剂盒 抗逆系列

产品货号：BC9073

产品名称：超氧阴离子含量检测试剂盒 Superoxide Anion Activity Content Assay Kit

产品规格：100T/96S

产品简介：

自备试剂：该试剂盒实验过程中需自备试剂，详情见网站说明书

中文名称：超氧阴离子含量检测试剂盒

英文名称：Superoxide Anion Activity Content Assay Kit

别名：超氧阴离子试剂盒 超氧阴离子测试盒

规格：100T/96S

检测方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

储存条件：Store at 2-8℃，6 months

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder BC9073超氧阴离子含量检测试剂盒 Superoxide Anion Activity Content Assay Kit

测定意义：生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用，但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用，导致机体细胞和组织代谢异常，从而引起多种疾病。

测定原理：超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2－，NO2－在对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用下，生成红色的偶氮化合物，在530nm处有特征吸收峰，根据A530值可以计算样品中O2－含量。

需要的仪器，耗材:天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、氯仿和蒸馏水。

表中标准管测定。

产品说明：

生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用，但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用，导致机体细胞和组织代谢异常，从而引起多种疾病。

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO₂，NO₂在对氨基苯磺酰胺和萘乙二胺盐酸盐的作用下，生成紫红色的偶

氮化合物，在530nm有特征吸收峰，根据A₅₃₀值可以计算样本中O₂含量。

技术指标:

最di检出限:0.001 μmol/mL

线性范围:0.0015-0.25 μmol/mL

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、天平、水浴锅、离心机、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、氯仿(>98%，AR)、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

1.组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g，加入1mL提取液)加入提取液，冰浴匀浆后，12000rpm，4℃离心10min，取上清置冰上待测。

2.细胞/细菌:按照细胞/细菌数量(106个):提取液体积(mL)为5~1:1的比例(建议5百万细胞/细菌加入1mL提取液)，冰浴超声波破碎细胞/细菌(功率200w，超声3秒，间隔10秒，总时间3min):12000rpm，4℃离心10min，取上清置冰上待测

3.血清/血浆等液体:直接测定。若有浑浊，离心后取上清使用。

二、测定步骤:

1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至530nm，分光光度计用蒸馏水调零。

三、超氧阴离子含量计算公式:

1. 按照样本质量计算:

超氧阴离子含量(μmol/g质量)2xΔA 测定+(△A标准+C标准)xV提取÷W

=0.0625xΔA 测定÷ΔA标准÷W

超氧阴离子产生速率(μmol/min/g质量)=2xΔA测定÷(△A标准+C标准)xV 提取+W+T

=0.003125xΔA 测定+△A标准+W

2.按照样本蛋白质浓度计算:

超氧阴离子含量(μmol/mg prot) =2x△A测定+(△A标准+C标准)xV样本+(V样本xCpr)

=0.0625xΔA 测定-△A标准+Cpr

超氧阴离子产生速率(umol/min/mg prot)= 2xΔA测定+(△A标准+C标准)xV 样木+ (V 样木xCpr) ÷T

=0.003125xΔA 测定÷ΔA 标准÷Cpr

3.按照液体样本体积计算:

超氧阴离子含量(umol/mL) =2xΔA 测定+(△A标准+C标准)

=0.0625xΔA 测定÷△A标准

超氧阴离子产生速率(μmol/min/mL) =2xΔA 测定÷(△A标准+C标准)÷T

=0.003125xΔA 测定÷△A标准

4.按照细胞/细菌数量计算:

超氧阴离子含量(μmol/106cell)=2xΔA 测定+(ΔA标准+C标准)xV提取+N

=0.0625xΔA 测定÷△A标准+N

超氧阴离子产生速率(μmol/min/106cell) = 2xΔA 测定÷(△A标准+C标准)xV提取+N+T

=0.003125xΔA 测定+△A标准+N

C标准:标准管的浓度，0.03125μmol/mL:V样本:参与反应样本体积，0.1mL:V提取:提取过程中加入的提取液体积，1mL:Cpr:样本蛋白质浓度，mg/mL:W:样本质量，g:N:细胞/细菌数量，以10计:T:反应时间，20min;2:2分子的O2反应生成1分子NO2。

注意事项:

1、若 ΔA 测定<0.01，建议增大样本量或延长第一步反应时间后测定:若△a测定>1.2，建议稀释样本后进行测定，注意同步修改计算公式。

2、样本上清液制备好后，立刻进行测定，请勿将样本进行长时间的低温保存，以免影响测定结果。

3、试剂四为有机试剂，建议每次吸取时更换吸头，由于该试剂有一定的毒性，操作时请做好防护措施。

超氧阴离子含量检测试剂盒 抗逆系列

产品订购信息：

BC9073超氧阴离子含量检测试剂盒 Superoxide Anion Activity Content Assay Kit 100T/96S