氧化型gu胱甘肽(GSSG)是gu胱甘肽(GSH)的氧化形式，又称为二硫代gu胱甘肽，是两分子的gu胱甘肽氧化而成。GSSG会被gu胱甘肽还原酶还原成GSH，因此机体中大多数是以还原型形式存在。
氧化型gu胱甘肽含量检测试剂盒 抗逆系列

诺博莱德 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

氧化型gu胱甘肽含量检测试剂盒 抗逆系列

产品货号：BC9968

产品名称：氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

产品规格：50T/48S

产品简介：

中文名称：氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒

英文名称：Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

规格：50T/48S

检测方法：可见分光光度法 Spectrophotometer

储存条件：Store at 2-8℃，6 months

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder BC9968氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

产品说明：

氧化型gu胱甘肽(GSSG)是gu胱甘肽(GSH)的氧化形式，又称为二硫代gu胱甘肽，是两分子的gu胱甘肽氧化而成。GSSG会被gu胱甘肽还原酶还原成GSH，因此机体中大多数是以还原型形式存在。测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。本试剂盒利用gu胱甘肽能和5.5-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸)(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoicacid,DTNB)反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸，2-硝基-5-巯基苯甲酸在波长412nm处具有最大光吸收的特点，通过2-乙烯吡啶抑制样本中原有的还原型gu胱甘肽，然后利用gu胱甘肽还原酶将GSSG还原为GSH，借此测定氧化型gu胱甘肽的含量。

技术指标：

最di检出限：1.369μg/mL

线性范围：1.5625-50μg/mL

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、分析天平、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、移液器、1mL玻璃比色皿、匀浆器/研钵/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

1.组织：按照组织质量(g)：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例(建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆(匀浆器/研钵提前放冰上预冷)。12000g，4℃离心10min，取上清液放置于4C待测。若暂时不能完成测试可放于-80°C保存(可保存3天)

2.细菌、细胞：按照细胞数量(106个)：试剂一体积(mL)为5~10：1的比例(建议5百万细胞加入1mL试剂一)，反复冻融2-3次(可在液氮中冻结、37℃水浴中溶解)或者冰浴超声波破碎细胞(功率200w，超声 3s，间隔10s，重复30次)，12000g，4℃离心10分钟，取上清置于冰上待测。若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存3天)。

3.血液处理

血浆：将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，吸取上层血浆到另一支试管中，加入等体积的试剂一，沸水浴5min(封口膜，防止爆盖)。之后12000g，4℃离心10分钟，将上清移入新的试管中放置于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80C保存(可保存3天)。

血细胞：将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，弃去上层血浆用3倍体积的PBS清洗3次(用PBS重悬血细胞，600g离心10分钟)，加入等体积试剂一，沸水浴5min(缠封口膜，防止爆盖)。之后12000g，4C离心10分钟，吸取上清放于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存3天)。

二、测定步骤

1.分光光度计预热30min以上，调节波长至412nm，蒸馏水调零。

2.试剂三放置37°C水浴中保温30min。

3.标准品的稀释：吸取10mg/mL标准品,用蒸馏水稀释至50μg/mL.25μg/mL、12.5μg/mL.6.25μg/mL.3.125μg/mL、1.5625μg/mL。

三、GSSG含量计算

1.绘制标准曲线：

以标准管的浓度(μg/mL)为横坐标x，以(△A标准-ΔA空白)为纵坐标y，绘制标准曲线。根据标准曲线，将(ΔA测定-AA空白)带入公式计算样本浓度(μg/mL).

2.按蛋白浓度计算：GSSG含量(μg/mg prot)=xxV 样+(V 样xCpr )=x+Cpr

3.按样本质量计算：GSSG含量(μg/g质量) =xxV 样+(V 样+V 样总xW)=x÷W

4.按细胞/细菌数量计算：GSSG含量(μg/10⁶cell) =xxV 样+(V 样÷V 样总xN)=x+N

5.按液体体积计算：GSSG含量(μg/mL)=2x

V样总：上清液总体积，ImL;V样：加入反应体系中上清液体积，100μL=0.1mL：W：样本质量，g;

Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL;N：细胞/细菌数量，以106计：2：血浆(血细胞)稀释一倍。

注意事项：

1.若不确定样本中GSSG含量的高低，可稀释几个梯度后再进行测量。

2.如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

3.因为试剂一中含有蛋白质沉淀剂，因此上清液不能月于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量，需另取组织。

氧化型gu胱甘肽含量检测试剂盒 抗逆系列

产品订购信息：

BC9968氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit 50T/48S