氧化型gu胱甘肽(GSSG)是gu胱甘肽(GSH)的氧化形式，又称为二硫代gu胱甘肽，是两分子的gu胱甘肽氧化而成。GSSG会被gu胱甘肽还原酶还原成GSH，因此机体中大多数是以还原型形式存在。
氧化型gu胱甘肽含量检测试剂盒 抗逆系列

诺博莱德 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

氧化型gu胱甘肽含量检测试剂盒 抗逆系列

产品货号：BC9963

产品名称：氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

产品规格：100T/96S

产品简介：

中文名称：氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒

英文名称：Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

别名：氧化型gu胱甘肽含量测定试剂盒 GSSG Kit 氧化型gu胱甘肽（GSSG）含量测定试剂盒 氧化型gu胱甘肽（GSSG）含量测试盒

规格：100T/96S

检测方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

储存条件：Store at 2-8℃，6 months

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder BC9963氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

测定意义：GSH/GSSG是细胞内最重要的氧化还原对之一。因此，测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态，也是gu胱甘肽氧化还原循环的主要指标之一。

测定原理：利用2-VP法测GSSG含量。

需要的仪器，耗材:低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。

产品说明：

氧化型gu胱甘肽(GSSG)是gu胱甘肽(GSH)的氧化形式，又称为二硫代gu胱甘肽，是两分子的gu胱甘肽氧化而成。GSSG会被gu胱甘肽还原酶还原成GSH，因此机体中大多数是以还原型形式存在。测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。本试剂盒利用gu胱甘肽能和5.5-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸)(5.5’-dithiobis-2-nitrobenoicacid，DTNB)反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸，2-硝基-5-巯基苯甲酸在波长412nm处具有最大光吸收的特点，通过2-乙烯吡啶抑制样本中原有的还原型gu胱甘肽，然后利用gu胱甘肽还原酶将GSSG还原为GSH，借此测定氧化型gu胱甘肽的含量。

技术指标:

最di检出限:3.211μg/mL

线性范围:3.9-125μg/mL

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、分析天平、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、匀浆器/研钵/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆(匀浆器/研钵提前放冰上预冷)。12000g，4℃离心10min，取上清液放置于4℃待测。若暂时不能完成测试可放于-80C保存(可保存3天)。

2.细菌、细胞:按照细胞数量(106个):试剂一体积(mL)为5~10:1的比例(建议5百万细胞加入1mL试剂

一)，反复冻融2-3次(可在液氮中冻结、37C水浴中溶解)或者冰浴超声波破碎细胞(功率200w，超声 3s,间隔10s，重复30次)，12000g，4℃离心10分钟，取上清置于冰上待测。若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存3天)。

3.血液处理

血浆:将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，吸取上层血浆到另一支试管中，加入等体积的试剂一，沸水浴5min(缠封口膜，防止爆盖)。之后12000g，4℃离心10分钟，将上清移入新的试管中放置于4C待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存3天)。

血细胞:将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，弃去上层血浆用3倍体积的PBS清洗3次(用PBS重悬血细胞，600g离心10分钟)，加入等体积试剂一，沸水浴5min(缠封口膜，防止爆盖)。之后12000g，4℃离心 10分钟，吸取上清放于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80C保存(可保存3天)。

二、测定步骤

1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至412nm，分光光度计蒸馏水调零。

2、试剂三放置37°C水浴中保温30min。

3、标准品的稀释:吸取10mg/mL标准品，用蒸馏水稀释至125μg/mL、62.5μg/mL、31.25μg/mL、15.625μg/mL、7.8125μg/mL、3.90625μg/mL.

三、GSSG含量计算

1.绘制标准曲线:

以标准管的浓度(μg/mL)为横坐标x，以(△A标准-△A空白)为纵坐标y，绘制标准曲线。根据标准曲线，将(AA测定-△A空白)带入公式计算样本浓度(μg/mL).

2.GSSG含量计算:

(1)按蛋白浓度计算:GSSG含量(μg/mg prot)=xxV样+(V样xCpr )=x+Cpr

(2)按样本质量计算:GSSG含量(μg/g质量)=xxV 样+(V 样+V 样总xW)=x÷W

(3)按细胞/细菌数量计算:GSSG含量(μg/106 cell)=xxV 样+(V 样+V 样总xN)=x+N

(4)按液体体积计算:GSSG含量(μg/mL)=2x

V样总:上清液总体积，1mL;V样:加入反应体系中上清液体积，20μL=0.02mL;W:样本质量，g;

Cpr:上清液蛋白质浓度，mg/mL;N:细胞/细菌数量，以10计;2:血浆(血细胞)稀释一倍。

注意事项:

1.若不确定样本中GSSG含量的高低，可稀释几个梯度后再进行测量。

2.如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样大量或者稀释样本后再进行测定。

3.因为试剂一中含有蛋白质沉淀剂，因此上清液不能用于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量，需另取组织。

氧化型gu胱甘肽含量检测试剂盒 抗逆系列

产品订购信息：

BC9963氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit 100T/96S