诺博莱德 酸性磷酸酶染色试剂盒偶氮偶联法 酶类染色
NobleRyder G9279 酸性磷酸酶染色试剂盒(偶氮偶联法),Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method)
产品货号:G9279
产品名称:酸性磷酸酶染色试剂盒(偶氮偶联法),Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method)
产品规格:4*2ml / 4*10ml / 4*20ml
产品简介:
中文名称:酸性磷酸酶染色试剂盒(偶氮偶联法)
英文名称:Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s/Azo Coupling Method)
规格:4*2ml ; 4*10ml ; 4*20ml
储存条件:-20℃,避光保存,有效期6个月。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder G9279 酸性磷酸酶染色试剂盒(偶氮偶联法),Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method)产品介绍
酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)分布极广泛,遍布各种组织,主要存在于细胞的溶酶体内,所以常作为溶酶体标志酶。溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内。各种动物中的酸性磷酸酶各有不同,酸性磷酸酶的适宜pH为4.5~5.5。酸性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)以萘酚AS-BI为底物,在酸性pH下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸和萘酚,萘酚与重氮盐偶联生成有色产物,定位于细胞质中。对某些酸性磷酸酶来讲,Cu2+、酒石酸根离子和四氯化碳以及醛类也都是抑制剂,Mn2+为该酶的激活剂。多用于新鲜血涂片、细胞涂片、冰冻切片等,亦可用于石蜡切片。
操作步骤:(仅供参考)
(一) 样本处理:
1、 细胞涂片:取新鲜全血或骨髓制备涂片,推玻片于载玻片保持30度,置于血液或细胞滴液的正前方,稍往后移与血液或细胞滴液接触使后者沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动至均匀铺开为止,自然晾干。
2、 贴壁培养细胞、细胞爬片:吸去培养基,1×PBS清洗3-4次,沥去多余水分。取出细胞爬片。
3、 冰冻切片:从冰箱取出放置恢复室温,浸入蒸馏水清洗1-2min,沥去多余水分。
4、 石蜡切片:石蜡切片脱蜡5-10min,重复一次。无水乙醇5min,90%乙醇和70%乙醇各2min,蒸馏水浸洗2min,沥去多余水分。
(二) 染色孵育:
1、 使用2-8℃预冷的ACP固定液固定30s-3min,多数情况下30-60s即可。
2、 蒸馏水洗,沥去多余水分(不宜过分干燥)。
3、 (切片处理)滴加ACP孵育液覆盖切片,置于湿盒内37℃温箱孵育45-60min,蒸馏水洗。
4、 (贴壁细胞)滴加 ACP孵育液覆盖细胞,置于37℃温箱孵育45-60min,蒸馏水洗。
5、 复染:苏木素或甲基绿复染液染色2-3min。如选用苏mu素染色液复染,染色后须自来水返蓝10min或1×PBS返蓝3-5min。
(三) 封片观察:
1、 (切片处理)蒸馏水稍洗,沥去多余水分,滴加水性封片剂封片后镜检观察。
2、 (贴壁细胞)蒸馏水稍洗,可带水或1×PBS镜下观察。
注意事项:
1. 该染色试剂盒为酶活原位染色试剂盒,反应底物和染料易失效,收到产品后建议第一时间根据说明书 描述温度妥善保存。
2. 对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
3. 酶活易受多种因素影响导致衰减或消失。建议样本新鲜取材,使用预冷固定液在2-8℃冰箱固定,时 间不宜超过24h。包埋时推荐使用低熔点蜡(52-56℃),避免热失活。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
酸性磷酸酶染色试剂盒偶氮偶联法 酶类染色
产品订购信息:
NobleRyder G9279 酸性磷酸酶染色试剂盒(偶氮偶联法),Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method) 4*2ml / 4*10ml / 4*20ml
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