诺博莱德 兔SP检测试剂盒SP Kit(Rabbit)
兔SP检测试剂盒-常备现货
产品货号:SP8809
产品名称:兔SP检测试剂盒SP Kit(Rabbit)
英文名称:SP Kit(Rabbit)
产品规格:3ml ; 6ml ; 18ml ; 110ml
产品简介:
别名:兔SP试剂盒/兔SP免疫组织化学试剂盒/兔SP超敏免疫组化试剂盒
储存条件:-20℃,avoid light,1 year
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder SP8809 兔SP检测试剂盒SP Kit(Rabbit)
适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验DAB显色。
SP 试剂盒是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链mei菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生wu素有ji高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链mei亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,因此基于链mei亲和素的免疫组化方法背景很低。
操作步骤:(以石蜡切片为例)
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲苯,三次乙醇)。
2. 3% H2O2 室温处理5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3.可选步聚:
a、热修复抗原,将切片浸入0.01M柠檬酸钠缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
b、酶消化,滴加消化液,37℃10分钟,PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步,直接进入下一步。
4. 滴加封闭液,室温20分钟。甩去多余液体,免洗。
5. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 孵育1小时左右或20℃ 2小时左右,也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次 2 分钟。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
6. 根据用量,用稀释液将羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul 羊抗兔IgG浓缩液混匀,此工作液4℃可保存一周)。滴加羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟。
7.根据使用量,用稀释液将链酶亲和素-POD 浓缩液按 1:100 稀释成工作液(1ml 稀释液加入 10ul
链酶亲和素-POD浓缩液混匀,此工作液4℃可保存一周)。滴加链酶亲和素-POD工作液,20-37℃,
30 分钟。PBS (pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。
8.DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1ml PBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB 显色液B 。充分混匀后滴加到切片上。室温显色,镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9.苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞爬片,固定后,PBS漂洗两次,再用0.5% Triton X-100室温孵育20分钟,PBS漂洗两次,3% H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次,接上述第4步。
对于冰冻切片,固定后,PBS漂洗两次,接上述第二步。
注意事项:
如果染色背景过高,在SP反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
兔SP检测试剂盒-常备现货
产品订购信息
SP8809 兔SP检测试剂盒SP Kit(Rabbit) 3ml ; 6ml ; 18ml ; 110ml
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