诺博莱德 植物核蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)-酶法
植物核蛋白提取试剂盒-酶法 常备现货
产品货号:P5078
产品名称:植物核蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)-酶法
产品规格:50T/100T
产品简介:
中文名称:植物核蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)-酶法
规格:100T ; 50T
储存条件:2-8℃,1 year
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder P5078 植物核蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)-酶法
植物核蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。本试剂盒含有的du特配方能够有效溶解植物核组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒的蛋白提取组份中不含有不可透析除去的去垢剂组份,不含SDS、TritonX-100、chaps等可能影响质谱实验的组份,最后得到的蛋白质样品经过透析或者脱盐处理后将不含有去垢剂、高浓度盐等影响,基本可以满足下游任意的蛋白质组学相关实验研究。本产品的蛋白酶抑制剂混合物中不含AEBSF,可以避免由于AEBSF导致的质谱峰漂移,因此使用本产品提取的蛋白样品可以用于质谱(MassSpectrometry,MS)检测和分析,蛋白质组学(proteomics)等相关研究。本试剂盒提取的蛋白也可用于WesternBlotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、酶活性测定等下游蛋白研究实验。本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
适用样本:植物
注:
1. 提取液A 长期不用请置-20℃保存。
2. 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
3. 蛋白酶抑制剂在 2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
4. 试剂拆封后请尽快使用完!
产品简介:
植物核蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白。提取过程简单方便,可在 1 小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。
本试剂盒含有的du特配方能够有效溶解植物核组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合
物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒的蛋白提取组份中不含有不可透析除去的去垢剂组份,不含 SDS、Triton X-100、chaps 等可能影响质谱实验的组份,最后得到的蛋白质样品经过透析或者脱盐处理后将不含有去垢剂、高浓度盐等成分,基本可以满足下游任意的蛋白质组学相关实验研究。
本产品的蛋白酶抑制剂混合物中不含 AEBSF,可以避免由于 AEBSF 导致的质谱峰漂移,因此使用本产品提取的蛋白样品可以用于质谱(Mass Spectrometry, MS)检测和分析,蛋白质组学(proteomics)等相关研究。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有 EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白也可用于 Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有 EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分,不可直接用于2D 电泳,如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳,请使用其他货号试剂盒。也可以将最后样品除盐后再用于2D 电泳,用脱盐柱脱盐处理。
本试剂盒采用酶法提取,酶法提取制备的植物核蛋白,回收率提高,纯度高,但是耗时较长。非酶法的提取试剂盒提取过程简单方便,速度快,可在1 小时内完成,而且绝少交叉污染,提取得到的蛋白活性优于酶法提取,但是回收率相比酶法较低。如果需要更加快捷的提取试剂盒,可以选择非酶法的提取试剂盒,对提取速度没有要求的话,可以选择酶法提取试剂盒。请根据实际需要选择试剂盒。
自备试剂和仪器:
离心机、振荡器、匀浆器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒,1×PBS 缓冲液、蛋白定量试剂盒,离心管、吸头、一次性手套、100 μm 细胞筛。
产品特点:
1. 使用方便。
2. 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3. 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4. 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6 种独立的蛋白酶抑制剂 AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64,每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
使用方法:
一、使用注意事项:
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
二、植物组织核蛋白提取:
1. 提取液制备:
将试剂 B1 和试剂 B2 混合,配成蛋白提取液 B,充分混匀备用。
每 500μl 提取液 B 中加入 2μl 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
【注】:
1) 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
2) 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完,再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
2. 取 500 mg-1 g 新鲜植物叶片样本,用纯水洗净擦干后去除叶梗和粗脉,用手shu剪刀或锋利的刀片剪切碎,切成 0.5 mm*0.5 mm 细块。
3. 加入 500μl 提取液 C,充分混匀。
4. 将悬液置振荡器上室温振荡 12-72 小时。
【注】:
1) 使用振荡器/摇床的较低转速,保证提取液能轻微晃动即可。
2) 没有振荡条件也可以不振荡,中间每隔几小时用移液器轻轻吹打混匀即可。
3) 不同类型的植物样本需要处理的时间差异较大。拟南芥较易处理,鲜嫩叶片较易处理,年龄小的样本处理时间短。
4) 部分细胞壁较厚的植物类型可能需要处理更长时间。可以延长至 72 小时以上处理以提高得率。
5. 在 1000×g 条件下离心 5-10 分钟,弃上清,收集沉淀。
【注】:
1) 有条件可以用 100 um 细胞筛网过滤提取液处理液后,收集滤液再离心。
2) 没有细胞筛可以不过滤。
6. 在沉淀中加入 1 ml 提取液 A 后用匀浆机充分匀浆或者用匀浆器充分匀浆。
7. 将匀浆用 100μm 细胞筛过滤。
【注】:
1) 液体量少时可以加入 1-2 ml PBS 混匀后再用细胞筛过滤。
2) 没有细胞筛时可以不过滤,将匀浆液静置 1 分钟,待大的没有破碎的组织块自然沉降,吸取上清。
3) 部分黏液较多的植物样本可能难以吸取,可以将 1 ml 吸头的口剪掉一点再吸。
8. 将滤液在 100×g 条件下离心 3 分钟,弃沉淀,收集上清。
【注】:
1) 部分黏液较多的植物样本可能很粘稠难以离心,可以加入 1-2 ml PBS 稀释,充分混匀
后再离心。
9. 在 2000×g 条件下离心 10 分钟,弃上清,收集沉淀。
10. 在沉淀中加入 150-250μl 提取液 B,充分混匀。
11. 置振荡器 2-8℃振荡 30-45 分钟。
【注】:
1) 用振荡器/摇床的较低转速,保持液体有轻微晃动即可。
2) 没有低温振荡条件可以不振荡,在 2-8℃静置,稍微延长处理时间,中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。
12. 在 4℃,12000×g 条件下离心 15 分钟。
13. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到核蛋白。
14. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
【注】:
1) 建议用 BCA 法进行蛋白定量。
2) 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
15. 将蛋白样品透析处理或者脱盐柱脱盐处理后用于下游实验。
【注】:
1) 蛋白样品中含有盐,需要脱盐处理后用于双向电泳。
2) 经透析或脱盐离心柱处理的蛋白样品不含有去垢剂和高浓度盐。
注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得优良实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并che底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
植物核蛋白提取试剂盒-酶法 常备现货
产品订购信息:
P5078 植物核蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)-酶法 50T/100T
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