酵母线粒体膜蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种酵母样本中提取线粒体膜蛋白。提取过程简单方便。
本试剂盒含有的du特配方能够有效溶解线粒体膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
酵母线粒体膜蛋白提取试剂盒 常备现货

诺博莱德 酵母线粒体膜蛋白提取试剂盒

酵母线粒体膜蛋白提取试剂盒 常备现货

产品货号：P5029

产品名称：酵母线粒体膜蛋白提取试剂盒

产品规格：50T/100T

产品简介：

中文名称：酵母线粒体膜蛋白提取试剂盒

规格：100T ; 50T

储存条件：2-8℃，1 year

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder P5029 酵母线粒体膜蛋白提取试剂盒

适用样本：酵母

注：

1. 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2. 蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3. 试剂拆封后请尽快使用完！

产品简介：

酵母线粒体膜蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种酵母样本中提取线粒体膜蛋白。提取过程简单方便。

本试剂盒含有的du特配方能够有效溶解线粒体膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。

本试剂盒提取的线粒体膜蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、酶活性测定等下游蛋白研究实验。

本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白，下游应用范围广，提取液裂解细胞的能力较温和，需要根据实际样本情况优化裂解时间。

本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。

本试剂盒提取的膜蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，需要透析、脱盐后再用于2D电泳。

自备试剂和仪器：

离心机、振荡器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒、PBS缓冲液、蛋白定量试剂盒、离心管、吸头、一次性手套

使用方法：

一、使用注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得优良实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

4. 提取液D在使用前须一直置于2-8℃条件，否则下游膜蛋白提取时会导致不容易分层。

5. 膜蛋白电泳时loading buffer应该避免煮沸。

6. 膜蛋白电泳时可以提高 loading

二、酵母线粒体膜蛋白提取：

1. 提取液制备：

每 500μl 冷的酵母线粒体膜蛋白提取液 D 中加入 2μl 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取适量酵母培养物，在 4℃，1000×g 条件下离心 5-10 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。

3. 用 PBS 洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 每 100-200ul 体积或 100-200mg 湿重酵母沉淀物中加入 400ul 酵母线粒体提取液 A，混匀后，在30℃条件下保温 15 分钟。

5. 在 1000×g 条件下离心 5-10 分钟，收集酵母沉淀。

6. 酵母沉淀物中加入 500ul 酵母线粒体提取液 B，充分混匀后。

7. 在 37℃或室温条件下轻微振荡 30-90 分钟。

8. 在 2000×g 条件下离心 5-10 分钟，弃上清，收集沉淀。

9. 沉淀用 PBS 洗涤两次。离心收集沉淀。

10. 在沉淀中加入 800μl 酵母线粒体提取液 C，充分混匀，然后在振荡器上振荡 15-30 分钟。

11. 在 4℃，500×g 条件下离心 5 分钟，弃沉淀，收集上清。

12. 将上清在 4℃，1000×g 条件下离心 5 分钟，弃沉淀，收集上清。

13. 将上清在 4℃，14000×g 条件下离心 20 分钟。弃上清，收集沉淀。

14. 在沉淀中加入 200-400μl 冷的线粒体膜蛋白提取液 D，充分混匀。

15.在 2-8℃条件下振荡 20-40 分钟。

16. 在 4℃，12000×g 条件下离心 5 分钟。

17. 将上清吸入另一干净离心管，在 37℃水浴 5-10 分钟。

18. 在 37℃，1000×g 条件下离心 5 分钟，此时溶液分为 2 层，小心移除上层部分，下层即为线粒体膜蛋白，约为 20-40ul。

19. 用 50-100ul 膜蛋白溶解液 E 溶解下层，即得酵母线粒体膜膜蛋白样品。

20. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

注意事项：

1. 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

2. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并che底清除残留清洁剂。

3. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

4. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

5. 如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

酵母线粒体膜蛋白提取试剂盒 常备现货

产品订购信息：

P5029  酵母线粒体膜蛋白提取试剂盒  50T/100T