诺博莱德 动物组织/细胞基因组DNA提qu试剂盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit
动物组织/细胞基因组DNA提qu试剂盒质粒提取
产品货号:D9588
产品名称:动物组织/细胞基因组DNA提qu试剂盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit
英文名称:Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit
产品规格:50T/100T
产品简介:
储存条件:酶附件-20℃,其它试剂RT,复检期1年
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyderD9588 动物组织/细胞基因组DNA提qu试剂盒本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和du特的缓冲液系统,提取组织和细胞的基因组DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司te有新型材料,能够高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。 提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、 PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
操作步骤:
1. 样品的处理:
(1) 细胞:取1×106-1×107个悬浮培养细胞,12000rpm离心1min收集细胞,贴壁细胞先用yi蛋白酶消化处理,再用预冷的PBS吹打成细胞悬液,然后12000rpm离心1min收集细胞,尽量除去上清,加200μL溶液A,振荡至che底混匀。
(2) 组织:组织量不宜过大,一般不要超过25mg,可以使用匀浆器匀浆,最好用液氮研磨成粉末状,再用预冷的PBS或无菌水充分悬浮,然后12000rpm离心1min收集细胞,尽量除去上清,加200μL溶液A,振荡至che底混匀。
2. 向悬浮液中加入2μL RNase A,55℃放置5min。
3. 加入20μL的蛋白酶K,充分颠倒混匀,56℃水浴消化,细胞消化时间较短,组织消化时间较长,一般需要1-3个小时才能完成(鼠尾需要消化过夜)。消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化wan全为止。消化wan全的指标是:液体清亮及粘稠。
4. 加入200μL体积溶液B,充分颠倒混匀,如出现白色沉淀,可在75℃放置15-30min,沉淀即会消失,不影响后续实验。如溶液未变清亮,说明样品消化不che底,可能导致提取的DNA量少及不纯,还有可能导致堵塞吸附柱。
5. 加入200μL无水乙醇,充分振荡混匀15s,溶液变清亮。此时可能会出现絮状沉淀,不影响DNA的提取,将溶液和絮状物都加入吸附柱中。
6. 12000rpm 离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μL 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm 离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
8. 重复步骤7。
9. 12000rpm 离心 2min,将吸附柱敞口置于室温或 50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
10. 将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50-200μL经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm离心2min。
11. 可将离心所得洗脱液再加入吸附柱中,12000rpm 离心 2min,即可得到高质量的基因组DNA。
注意事项:
1. 试剂盒拆封后,RNase A和蛋白酶K需放置-20℃保存。
2. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3. 如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。
4. 洗脱缓冲液的体积最好不少于50μL,体积过小会影响回收效率:洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。
动物组织/细胞基因组DNA提qu试剂盒质粒提取
产品订购信息
D9588 动物组织/细胞基因组DNA提qu试剂盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit 50T
D9588 动物组织/细胞基因组DNA提qu试剂盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit 100T
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