诺博莱德 普通RIPA裂解液(组织/细胞)
普通RIPA裂解液(组织/细胞) 样本裂解
产品货号:R8808
产品名称:普通RIPA裂解液(组织/细胞),蛋白提取试剂盒,RIPA buffer
产品规格:100ml /500ml
产品简介:
别名:蛋白提取试剂盒
英文名称:RIPA buffer
中文名称:普通RIPA裂解液(组织/细胞)
规格:100ml ; 500ml
储存条件:附件PMSF-20℃,裂解液4℃。有效期1年
NobleRyder R8808普通RIPA裂解液(组织/细胞),蛋白提取试剂盒,RIPA buffer产品介绍
运输温度:常温运输
普通RIPA裂解液(组织/细胞)产品配有一支PMSF(100mM,1.5ml)
产品简介:RIPA 组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)。本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
使用说明 :
如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
根据使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,混匀备用 (PMSF现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液,用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 5-10×105细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品:把组zhi剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液
(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量) 。
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项:
1、使用本裂解液可以裂解细胞核,释放出核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来, 造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液煮沸再离心,离心后直接上样电泳; 若想测定浓度,可入加少量 SDS(1%),煮沸后离心测浓度。
2、本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒,请选择 BCA 法或者 Lowry 法检测蛋白浓度。
3、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物, 随后离心取上清用于后续实验。
普通RIPA裂解液(组织/细胞) 样本裂解
产品订购信息:
R8808普通RIPA裂解液(组织/细胞),蛋白提取试剂盒,RIPA buffer 100ml /500ml
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