土壤亚硝酸还原酶（Solid-Nitrite reductase，S-NiR）试剂盒说明书

分光光度法 50 管/24 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

土壤亚硝酸还原酶是反硝化作用中的关键酶之一，参与亚硝酸盐至NO 的还原反应，它的活性反映了生物降解过程中氮素的转化效率，为氮素转化规律的研究提供一定的依据。

测定原理：

亚硝酸还原酶可将NO2—还原为NO，使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的 NO —减少，即540nm 处吸光值的变化可反应土壤中亚硝酸还原酶的活性。

土壤亚硝酸还原酶试剂盒 常备现货

试剂的组成和配制：

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加 10ml 蒸馏水溶解。

试剂三：液体 10ml×1 瓶，4℃保存。（如出现沉淀可以 70-80℃加热溶解；

试剂四：液体 25ml×1 瓶，4℃避光保存。（如出现沉淀可以 70-80℃加热溶解；工作液：临用前根据用量将试剂四和试剂五以 1:1 的比例混合。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

自备仪器和用品：

天平、可见分光光度计、水浴锅、低温离心机、1ml 玻璃比色皿。

样品处理：

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。

测定操作表：

计算公式：

标准曲线：y = 1.5562x+ 0.0088，R² = 0.996；x 为标准品浓度（μmol/ml），y 为吸光值（A 标准管-A空白管）。

酶活单位定义：每g 土样每天还原 1μmol NO2ˉ 的量为一个酶活力单位。

S-NiR（μmol /d /g 土样）=[A 空白管-(A 测定管-A 对照管) -0.0088] ×V 标÷1.5562÷W÷T

= 3.084×[A 空白管-(A 测定管-A 对照管) -0.0088]÷W

T：反应时间，1h=1/24d；V 标：标准液体积，0.2ml； W：样本质量，g。

注意事项：

1. 配制好的工作液 3 天内使用完。

2. 若吸光值超过 3，将上清液进行适当的稀释后再加入工作液显色，并在计算公式中乘以稀释倍数。

3. 严格控制显色时间，否则会对结果有影响。

4. 标准曲线线性范围为 0.03μmol/ml-1.5μmol/ml。

5. A 空白管-（A 测定管-A 对照管）线性范围为 0.02-3。

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