FDA 水解酶(Fluorescein diacetate,FDA)试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
FDA 水解反应能很好的反应土壤中微生物活性和土壤质量的变化以及生态系统中有机质的转化,是土壤质量研究中的重要生物学指标之一。
FDA 是一种无色化合物,在介质中能被许多土壤酶所催化水解,并经脱水反应,产生酶解终产物荧光素,稳定不易被分解,并在 490nm 处有强吸收峰,通过检测 490nm 处的吸光值变化可计算得 FDA 水解酶活性。
产品名称 | BO6040-50T/24S | Storage |
标准液:液体 | 5ml | 4℃ |
试剂一:液体 | 50ml | 4℃ |
试剂二:粉剂 | 1 瓶 | -20℃避光 |
试剂三:液体 | 50ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
试剂二:粉剂 1 瓶,-20℃避光保存,临用前加 5ml 试剂三溶解。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
称取风干过 30-50 目筛土壤约 0.1g,备用。
空白管 | 标准管 | 对照管 | 测定管 | |
样本(g) | 0.1 | 0.1 | ||
标准液(μl) | 100 | |||
双蒸水(μl) | 100 |
试剂一(μl) | 500 | 500 | 600 | 500 | ||
试剂二(μl) | 100 |
充分混匀,30℃,震荡 1h
试剂三(μl) | 400 | 400 | 400 | 400 |
10000g,25℃,离心 5min,取上清测定 490nm 处吸光值 A,△A1=A 标准管-A 空白管,△A2=A 测定管-A 对照管
酶活性定义:每克土壤每天产生 1μmol 荧光素的量为一个酶活力单位。
FDA 活性(μmol/d/g 干重)=(△A2÷△A1×C 标准品)×V 反总÷W= 2.4×(△A2÷△A1)÷W C 标准品:标准品浓度 100μmol/L;V 反总:反应总体积,1ml;W:样本质量,g
1、空白管和标准管只需测定一次。
2、尽量采用新鲜土样或者短期低温保存样品,否则很难准确反映酶的活性。
3、测定之前进行预实验,若吸光值较高,请进行适当的稀释再测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
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