FastBeat 土壤 DNA 试剂盒可在不到 40 分钟的时间内直接从土壤样品中快速有效地分离 PCR 即用型基因组 DNA。专为与 MP Biomedicals 的 FastPrep® 仪器等微珠打动设备配合使用而设计，可在 40 秒内轻松裂解土壤生物种群。
土壤基因组DNA快速ti取试剂盒 核酸提取

FastBeat Soil DNA Kit (Bead Beating) FastBeat 土壤 DNA ti取试剂盒（珠磨法）

土壤基因组DNA快速ti取试剂盒 核酸提取

目录号：40415

  Kit Contents and Storage

All reagents, when store in indicated temperature, are stable for 9 months.

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准 

描述：

FastBeat 土壤 DNA 试剂盒可在不到 40 分钟的时间内直接从土壤样品中快速有效地分离 PCR 即用型基因组 DNA。专为与 MP Biomedicals 的 FastPrep® 仪器等微珠打动设备配合使用而设计，可在 40 秒内轻松裂解土壤生物种群。将样品放入含有 3 种珠子的 2.0 ml 管中，珠子是陶瓷和二氧化硅颗粒的混合物，旨在有效裂解所有土壤生物，包括历shi上难以溶解的来源，如真细菌孢子和内生孢子、革兰氏阳性菌、酵母、藻类、线虫和真菌。

该套件使用一种新颖的专有方法来去除高腐植酸含量，包括堆肥、沉积物和粪便等难处理的土壤类型。分离的 DNA 纯度高，可以更成功地从样品中对生物体进行 PCR 扩增。已经进行了 PCR 分析以检测多种生物体，包括细菌（例如枯草芽孢杆菌、炭疽杆菌）、真菌（例如酵母、霉菌）、藻类和放线菌（例如链霉菌）。

使用前的重要注意事项

向样品中加入磷酸钠和 MT 缓冲液后，微珠管中的填充体积应在样品管中留出足够的空气空间，以便进行高效的 FastPrep® 仪器处理。MP Biomedicals 建议使用 500 mg 起始材料，只要试管中有 250 - 500 μl 的空隙。微珠管过量填充可能导致样品损失或试管故障。珠管盖必须牢固，但不能拧得过紧，以防止样品泄漏。如果样品太大而无法在单个试管中处理，请分样并使用多个试管进行处理。这些试剂盒已在 FastPrep® 仪器中进行了严格测试。在 FastPrep® 仪器中以 6.0 的速度运行一次 40 秒就足以裂解几乎所有样品。如果用户通过实验确定需要额外的处理时间，则应在连续的 FastPrep® 仪器匀浆之间将样品在微珠管中的冰上孵育至少 2 分钟在连续的 FastPrep® 仪器均质化之间，以防止样品和试管过热。

如果您使用其他打珠设备，请按照制造商的说明手册设置适当的参数以获得良好的性能。

程序

注意：

ð  shou次使用前，将zhi定量的乙醇加入 PQ 溶液瓶、缓冲 WB 瓶中，充分混合，并在瓶子上打勾标记。

1.       向微珠管中加入多达 500 mg 的土壤样品。

2.       向微珠管中的样品中加入 980 μl 磷酸钠缓冲液。温和的 votex 混合。加入 120 μl MT 缓冲液。

注意：检查 MT 缓冲区。如果 MT 缓冲液沉淀，请在使用前将溶液加热至 60°C 直至溶解。

3.     在 FastPrep® 仪器中以 6.0 的速度设置 40 秒。

4.      以 12,000 x g 离心 5 分钟以沉淀碎片。

5.     将上清液转移至干净的 2.0 ml 离心管中。加入 250 μl PPS 溶液，用手摇动试管 10 次混合。在 4°C 下孵育 5 分钟。

6.      在室温下以 10,000 x g 离心管 3 分钟。避免沉淀，将最多 900 μl 上清液转移到干净的 2 ml 离心管中，但不超过 900 μl。

7.       加入 300 μl IRS 溶液（1/3 体积）并短暂涡旋。在 4°C 下孵育 5 分钟。

8.       在室温下以 10,000 x g 离心管 1 分钟。避免沉淀，将上清液转移到干净的 5 ml 离心管中。

9.   向澄清的上清液中加入 1.5 体积的 PQ 溶液，并通过移液混合。

示例：向 1100 μl 裂解物中加入 1650 μl PQ 溶液。如果回收的上清液较少，则相应地减少 PQ 溶液的量。加入乙醇后可能会形成沉淀，但这不会影响手术过程。

注意：确保已将乙醇添加到 PQ 溶液中。

注意：将 PQ 溶液直接移液到澄清的上清液上并立即混合非常重要。

10.    将大约 700 μl 混合物加载到离心过滤器（位于收集管中）上，并在室温下以 10,000 x g 离心 1 分钟。丢弃流出。再加载 700 μl 并重复，直到所有剩余的混合物都加载到离心过滤器上。

注意：处理的每个样品可能需要总共 4-5 次加载。

11.    向离心过滤器中加入 600 μl 缓冲液 WB，并在室温下以 10,000 x g 离心 30 秒。丢弃流出。用另一个 600 μl 缓冲液 WB 重复步骤 11。

注意：确保将乙醇添加到缓冲液 WB 中。

12.  在室温下以 13,000 x g 离心离心过滤器 2 分钟以干燥离心过滤器。

13.    小心地将离心过滤器放入干净的 1.5 ml 离心管中。避免将任何缓冲液 WB 溅到离心过滤器上。将 100 μl 洗脱缓冲液（可选：将水预热至 70–90°C 将提高 DNA 产量）至柱膜中心。在室温下孵育 3-5 分钟，然后以 13,000 x g 离心 1 分钟以洗脱 DNA。

注意：使用较小体积（最少 30 μl）的洗脱缓冲液将获得更高的浓度。

可选：将洗脱液放回离心柱中，重复洗脱一次。这会增加 DNA 的浓度约 10-15%。

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