β－葡萄糖醛酸苷酶（β-glucuronidase，β-GD）试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

β-GD 广泛存在于动物组织中，是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶，具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。该酶在肝细胞中含量较高。此外在胃癌组织中含量丰富，测定胃液β-GD活性对于研究胃癌具有重要的意义。

测定原理：

β-GD 催化ben酚 β-D-葡萄糖醛酸产生游离的fen酞，通过测定ben酚含量反应该酶活性高低。

β－葡萄糖醛酸苷酶试剂盒 糖代谢系列

组成：

试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前加入 5ml 蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂仍-20℃保存；试剂四：1μmol/ml 标准储备液 10ml，4℃保存；

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

自备仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

样品测定的前处理

按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤：

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。

2、样本测定（在 EP 管中加入下列试剂）

混匀后，37℃水浴 30min

混匀， 540nm 下测定各管吸光值

注意：标准管和空白管只需测一次。

β-GD 活性计算：

（1） 按样本鲜重计算：

单位定义：每小时每g 鲜重样品中催化产生 1μmol 酚tai的量为一个活力单位。

β-GD（μmol/h/g 鲜重）= (C 标准管×V1)×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷(W×V1÷V2)÷T=2×

（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷W

（2） 按样本蛋白浓度计算：

单位定义：每小时每mg 组织蛋白催化产生 1μmol 酚tai的量为一个活力单位。

β-GD（μmol/h /mg prot）= (C 标准管×V1)×（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷(V1×Cpr)÷T=2×

（A 测定管-A 空白管）÷（A 标准管-A 空白管）÷Cpr

C 标准管：标准管浓度， 1μmol/ml；V1：加入样本体积：0.05ml；V2：加入提取液体积，1ml；T：反应时间，0.5h；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本鲜重，g。

β－葡萄糖醛酸苷酶试剂盒 糖代谢系列