诺博莱德 吲哚乙酸氧化酶活性检测试剂盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit
吲哚乙酸氧化酶活性检测试剂盒 光合作用
产品货号:BC2983
产品名称:吲哚乙酸氧化酶活性检测试剂盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit
产品规格:100T/48S
产品简介:
自备试剂:该试剂盒实验过程中需自备试剂,详情见网站说明书
中文名称:吲哚乙酸氧化酶活性检测试剂盒
英文名称:Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit
规格:100T/48S
检测方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
储存条件:Store at -20℃,6 months
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
产品说明:
吲哚乙酸(IAA)在吲哚乙酸氧化酶的作用下,被氧化破坏失去活性。IAA氧化酶能调节植物体内吲哚乙酸的的水平,从而影响植物的生长。
IAA在无机酸条件下与FeCl3作用生成红色产物,在530nm下有最大吸收峰。酶活力的大小可用消耗IAA的速率表示。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器/超声破碎仪、乙醇(>98%,AR)、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量)
1、组织:称取约0.1g组织,加入ImL提取液进行冰浴匀浆。12000g4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
2、细胞或细菌样本的制备:先收集细胞或细菌样本到离心管内,弃上清,按照每500万细胞或细菌加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率200W,超声3s,间隔10s,重复30次)。12000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤
1、可见分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至530nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、标准液的稀释:将标准溶液用蒸馏水稀释为0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125μmol/mL的标准液。
三、吲哚乙酸氧化酶酶活计算
1、标准曲线的绘制:
以标准液的浓度(μmol/mL)为x轴,对应的△A标准为y轴绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将ΔA测定带入方程中计算得到样本浓度(x,μmol/mL)
2、吲哚乙酸氧化酶活力计算:
Solarbio
(1)按蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟消耗1nmolIAA的酶量定义为一个酶活性单位。
IAA氧化酶酶活(U/mg prot)=xxV酶促x1000+(V样xCpr)+T=333xx+Cpr
(2)按样本质量计算:
单位的定义:每g组织在反应体系中每分钟消耗1nmolIAA的酶量定义为一个酶活性单位。
IAA氧化酶酶活(U/g质量)=xxV酶促x1000+(W+V提取xV样)+T=333xx÷W
(3)按细胞或细菌数量计算:
单位的定义:每104个细胞或细菌在反应体系中每分钟消耗lnmolIAA的酶量定义为一个酶活性单位。
IAA氧化酶酶活(U/104cell)=xxV酶促x1000+(N÷V提取xV样)+T=333×x÷N
V酶促酶促反应总体积,0.08mL:1000:单位换算系数,1μmol=1000nmol;V样加入的样本体积,0.008mL:Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V提取:提取液体积,1mL;N:细胞数量,以万计;T:反应时间,30min。
吲哚乙酸氧化酶活性检测试剂盒 光合作用
产品订购信息:
BC2983吲哚乙酸氧化酶活性检测试剂盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit 100T/48S
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