诺博莱德 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit
氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 细胞
产品货号:BC9963
产品名称:氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit
英文名称:Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit
产品规格:100T/96S
产品简介:
产品别名:氧化型gu胱甘肽含量测定试剂盒/GSSG Kit 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量测定试剂盒/氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量测试盒
检测方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
储存条件:Store at 2-8℃,6 months
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyderBC9963 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit是gu胱甘肽(GSH)的化形式,又称为二硫代gu甘肽,是两分子的gu胱甘肽氧化而成。GSSG 会被gu胱甘肽还原酶还原成GSH,因此机体中大多数是以还原型形式存在。测定细胞内GSH 和GSSG含量以及GSHGSSG比值,能够很好地反映细胞新处的氧化还原状态。本试剂盒利用gu胱甘肽能和5.5-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸)(5.5'-dithiobis-2-nitrobenoic acid,DTNB)反应产生 2-硝基-5-巯基苯甲酸,2-硝基-5-巯基苯甲酸在波长 412nm 处具有最大光吸收的特点,通过 2-乙烯吡啶抑制样本中原有的还原型gu胱甘肽,然后利用gu胱甘肽还原酶将GSSG还原为GSH,借此测定氧化型gu胱甘肽的含量。
技术指标:
*低检出限:3.2llHg/mL
线性范围:3.9-125 ug/mL
注意:实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、分析天平、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、匀浆器/研钵/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL 试剂一)进行冰浴匀浆(匀浆器/研钵提前放冰上预冷)。12000g,4℃离心10min,取上清液放置于4℃待测。若暂时不能完成测试可放于-80℃C保存(可保存3天)。
2、细菌、细胞:按照细胞数量(106个):试剂一体积(mL)为5~10:1的比例(建议5百万细胞加入1mL 试剂一),反复冻融2-3次(可在液氮中冻结、37℃℃水浴中溶解)或者冰浴超声波破碎细胞(功率200w,超声 3s,间隔10s,重复30次),12000g,4C离心10分钟,取上清置于冰上待测。若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存3天)。
3、血液处理
血浆:将收集的抗凝血于4℃,600g离心10分钟,吸取上层血浆到另一支试管中,加入等体积的试剂一,沸水浴 5min(缠封口膜,防止爆盖)。之后I2000g,4℃离心 10 分钟,将上清移入新的试管中放置于 4℃待测,若暂时不能完成测试可放于-80C保存(可保存3天)。
血细胞:将收集的抗凝血于4℃,600g离心10分铲,弃去上层血浆用3倍体积的PBS 清洗3次(用PBS重悬血细胞,600g离心 10分钟),加入等体积试剂一,沸水浴5min(缠封口膜,防止爆盖)。之后12000g,4℃离心10分钟,吸取上清放于4℃待测,若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存3天)。
注意事项:
1.若不确定样本中 GSSG 含量的高低,可稀释几个梯度后再进行测量。
2. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样云量或者稀释样本后再进行测定。
3.因为试剂一中含有蛋白质沉淀剂,因此上清液不能月于蛋白浓度测定。如测定蛋白含量,需另取组织。
氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 细胞
产品订购信息
BC9963 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit 100T/96S
电话
微信扫一扫