产品货号：F6388
产品名称：Fluo-4，AM 钙荧光探针Fluo-4，AM
英文名称：Fluo-4，AM
产品规格：100ug/1mg/10*100ug
Fluo-4，AM 钙荧光探针 细胞功能检测

诺博莱德  Fluo-4，AM 钙荧光探针Fluo-4，AM

Fluo-4，AM 钙荧光探针   细胞功能检测

产品货号：F6388

产品名称：Fluo-4，AM 钙荧光探针Fluo-4，AM

英文名称：Fluo-4，AM

产品规格：100ug/1mg/10*100ug

产品简介：

别名：钙荧光探针Fluo-4, AM

分子式：C₅₁H₅₀F₂N₂O₂₃

分子量：1096.94

外观(性状)：冻干粉（橙红色）

激发波长/发射波长(Ex/Em)：494/516

储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期1年。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyderF6388 Fluo-4，AM 钙荧光探针Fluo-4，AM是一种将Fluo-3 结构中的Cl替换成F的钙荧光探针。由于将Cl替换成了电子吸引力更强的F，它的最大激发波长会向短波长处偏离10nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长，所以用氩激光器激发时，Fluo-4的荧光强度比Fluo-3强一倍。

Fluo-4, AM 穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4，从而被滞留在细胞内，Fluo-4若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，最大激发波长为494nm，最大发射波长为516nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。

操作说明：（forHumanTcells）

1，试剂

2 mM 的Fluo-4,AM/DMSO （将1mgFluo-4,AM 溶于442µLDMSO ）

Pluronic F127

Hanks balanced salt solution（HBSS）：建议使用不含钙镁、不含酚红的HBSS

HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mMNaCl，5mMKCl， 1mMCaCl2， 0.5mMMgCl2，5mMGlucose，0.1%BSA，pH7.4 ）

2，操作

（1）向Fluo-4,AM/DMSO 溶液中加入16.5mgPluronicF127，Pluronic F127 可以防止 Fluo-4,AM 在 HBSS 中聚合并能帮助其进入细胞。

（2）用HBSS 稀释Fluo-4,AM 溶液，制备4µM 的Fluo-4,AM 工作液。

（3）将Fluo-4,AM 工作液加入细胞，在37℃培养20分钟。

（4）加入5 倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS，再继续培养40分钟。

（5）用HEPES buffersaline 洗涤细胞 3 次，然后用HEPESbuffersaline 使细胞重悬浮，制成1×105cells/mL 的溶液。

（6）37 ℃下培养10分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长494nm，发射波长516nm 。

注意：标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。

Fluo-4，AM 钙荧光探针   细胞功能检测

产品订购信息

F6388 Fluo-4，AM 钙荧光探针Fluo-4，AM  100ug/1mg/10*100ug