诺博莱德 IEF考马斯亮蓝染色液
IEF考马斯亮蓝染色液 凝胶染色
产品简介:
考马斯亮蓝染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考马斯亮蓝 R250 为染料可用于 SDS-PAGE 或非变性 PAGE 等蛋白电泳胶的常规染色或 Western 转膜后 PAGE 胶上残余蛋白的检测。
等点聚焦染色后考马斯亮蓝染色又称 IEF 考马斯亮蓝染色,一般与三lv乙酸溶液及脱色液 联合使用。本染色液经过改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性气味的乙酸。
用途:IEF蛋白电泳胶的染色
自备材料:
1、20%三lv乙酸水溶液
2、水平或侧摆摇床
3、蒸馏水
4、20%甘油水溶液
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
操作步骤(仅供参考):
1、临用前,取适量的考马斯亮蓝染色液和硫酸铜溶液,按 99:1 的比例混合,即为 IEF 考 马斯亮蓝染色液,即配即用。
2、等点聚焦电泳结束后,取凝胶放入 5-10 倍体积的 20%三lv乙酸水溶液,置于水平或侧 摆摇床上缓慢摇动 30-60min。
3、倾去 20%三lv乙酸水溶液,加入 10 倍体积的 30%甲醇水溶液(含 10%醇),置于水 平或侧摆摇床上缓慢摇动 15-20min。
4、倾去 30%甲醇水溶液(含 10%乙醇),加入新鲜配制的 IEF 考马斯亮蓝染色液,置于水 平或侧摆摇床上缓慢摇动 20min 以上(胶厚度小于等于 1mm)或 1h 以上(胶厚度大于 1mm)。
5、倾去染色液,用蒸馏水冲洗。
6、加入适量常规脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶;推荐常规脱色液的配方是:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸馏水。
7、置于水平或侧摆摇床上缓慢摇动,室温脱色 4~24h,期间更换脱色液 2~4 次,直至蓝 色背景基本上全部被脱去,并且蛋白条带染色效果达到预期,通常蛋白条带在脱色 1~2h 后即可出现。
8、完成脱色后把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如 需避免溶涨,可以把胶保存在含 20%甘油水溶液中,长期保存可以制备干胶
注意事项:
1、染色时如果把凝胶和染色液一起放置在微波炉中适当加热,可以大大加快染色速度。但 加热时宜尽量避免沸腾,以免出现因暴沸而导致的凝胶碎裂。
2、脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸,可以使部分染料吸附在吸水纸上,加快脱色; 脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。
3、如果希望染色的背景更低,希望获得更加清晰的蛋白条带,可以加入适量的室温蒸馏水 进行洗涤。通过蒸馏水洗涤可以进一步降低背景。在 4℃蒸馏水中浸泡过夜可以获得背景更 低,条带更清晰的条带。在次日对 4℃蒸馏水浸泡过夜的已经进行了染色的凝胶再同前一天 一样进行染色和洗涤可以进一步改善染色效果,获得更好的考染蛋白条带。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
IEF考马斯亮蓝染色液 凝胶染色
产品订购信息:
P2840 IEF考马斯亮蓝染色液 100ml / 500ml
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