诺博莱德 ECL Plus超敏发光液,ECL超敏发光液,ECL发光液,ECL Western Blotting Substrate
ECL Plus超敏发光液 显色与信号检测
产品货号:PE8898
产品名称:ECL Plus超敏发光液,ECL超敏发光液,ECL发光液,ECL Western Blotting Substrate
产品规格:2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2
产品简介:
别名:ECL超敏发光液 ECL发光液
英文名称:ECL Western Blotting Substrate
中文名称:ECL Plus超敏发光液
规格:2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2
储存条件:2-8℃,avoid light,1 year
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
产品介绍
NobleRyder PE8898 ECL Plus超敏发光液,ECL超敏发光液,ECL发光液,ECL Western Blotting Substrate直接或间接检测与辣根过氧化物酶HRP关联的蛋白或核酸底物。这一du特的发光底物系统是目前zui灵敏的商业化荧光ECL检测试剂,具有ji高灵敏度和高信噪比,发光迅速,荧光可使X感光胶片感光达12小时以上,特别适用于痕量蛋白或核酸检测。同时该试剂允许使用更高的抗体稀释倍数(1:2000-1:10000),极其节省抗体。
ECL Plus级发光液,是一种可广泛应用于免疫学实验的化学发光试剂。实验效果优于市面上某zhiming品牌的超敏级发光液。
ECL Plus超敏发光液与辣根过氧化物酶进行反应,产生荧光,可以通过胶片和相对应的仪器进行信号收集。
ECL Plus灵敏度ji高,是市面上普通DAB的1000倍以上,在western实验中,HRP标记的抗体(1mg/ml)能达到10万级稀释,是某品牌的2-5倍左右。ji高的灵敏度可以让及大幅度的节省抗体成为可能,在这种情况下需要降低一抗或者二抗的稀释度,避免得到的是过暗的条带,难以比较。
ECL Plus超敏发光液发光时间长,将兔的IgG制备成蛋白上样样品,进行正常的免疫印迹实验(上面提到的都是这种情况情况下的稀释度,斑点试验的稀释度会更高),在化学发光拍照仪器上进行信号收集,在20分钟后,荧光强度与初始的荧光强度基本无变化,30分钟后二抗浓度高的荧光稍有衰减,其他的基本没有变化。
用途:用于HRP标记抗体的Western Blot和HRP标记探针的核酸杂交。
安全性:无特殊毒性,按普通化学品处理。
使用方法(仅供参考):
1. 常规电泳、转膜、HRP 标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。注意用 HRP 标记 IgG 或用一抗-链亲 和素-生wu素-HRP 夹心法。核酸杂交膜用 HRP 标记探针杂交,洗膜。
2. 在洗涤膜上的 HRP 标记二抗的同时,新鲜配制发光工作液:分别取等体积的溶液 A 和 B 混合, 放置使之恢复室温否则会减弱荧光强度。建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但 灵敏度略有减低。
3. 用镊子取出膜,搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜wan全干燥。将膜wan全浸入并与发光工作液充分接触(约 0.125mL 发光工作液/cm2膜)。室温孵育 3 分钟后立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度,有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应,使用过少的发光工作液不利于反应进行,也会导致膜上条带曝光不均匀和灵敏度明显降低。为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。
4. 用镊子夹起膜,搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。
5. 在 X 光胶片暗盒内面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将杂交膜贴在保鲜膜上,将保鲜膜折起来wan全包裹杂交膜,去除气泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。 用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内,最好蛋白带面向上。
6. 在黑暗中放入 X 感光胶片,分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。
注意事项:
1. 步骤 1-5 可在日光灯下操作;但发光液暴露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免。戴手套可以避免在膜上留下手印,保持膜的洁净。
2. 长时间曝光或蛋白质过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。
3. 发光工作液孵育约 3 分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见,低丰度蛋白条带 发光较弱,肉眼虽不可见但能使 X 胶片曝光。不能单凭肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使 X 胶片感光,因而弱带可曝光 1-10 小时。如果曝光后条带不 佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 发光和曝光。
4. 由于超敏发光液的高灵敏度,强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗 1:1000-1:4000,二抗 1:2000-1:5000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带,导致失败!
5. 某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜,例如“克林莱"牌保鲜膜。
6. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可帮助确定胶片上条带的准确 位置和大小。
7. NaN3 能抑制 HRP 活性,回收二抗时应避免使用 NaN3,如必需使用勿超过 0.01%。
ECL Plus超敏发光液 显色与信号检测
产品订购信息:
NobleRyder PE8898 ECL Plus超敏发光液,ECL超敏发光液,ECL发光液,ECL Western Blotting Substrate 2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2
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