诺博莱德 考马斯亮蓝G250染料试剂
考马斯亮蓝G250染料试剂 凝胶染色
Bradford 法是常用的蛋白浓度检测的方法,与传统方法相比,更简单、更稳定、兼容性更 好,Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M,DTT的浓度可高达5mM,但受高浓度的去垢剂的影响明显,故在用BradfordProtein Assay Kit 进行蛋白定量时,需确保SDS低于0.01%,TritonX-100低于0.05%,Tween20,60, 80 低于0.015%,含高浓度去污剂的蛋白定量,建议采用BCAProteinAssayKit。
考马斯亮蓝G250染料试剂由考马斯亮蓝G250、乙醇、磷酸等组成,用于考马斯染料结合 (Bradford)分析的总蛋白测量,其特点在于对蛋白样品中可能存在的大多数盐、溶剂、缓冲液、 硫醇、金属螯合剂、还原性物质等均不排斥,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到 0.5μg,待测样品体积为1~20μl,在50~1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
自备材料
1、酶标仪或分光光度计
2、蒸馏水
3、96 孔板或比色杯
操作步骤(仅供参考)
1、稀释蛋白标准(一般为BSA5mg/ml)使其终浓度为0.5mg/ml。注意:蛋白样品在什么溶液中,蛋白标准也应用什么溶液稀释,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释蛋白标准。
2、将标准品按0,1,2,4,8,12,16,20μl 加到 96 孔板的蛋白标准孔中,加蛋白标准稀释液补足至 20μl。
3、加适当体积样品到96孔板的样品孔中,补加标准品稀释液至20μl。
4、各孔加入200μl考马斯亮蓝G250染料试剂,室温放置3~5min。
5、酶标仪测定595nm波长处的吸光值,560~610nm之间的波长也可。
6、根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
考马斯亮蓝G250染料试剂 凝胶染色
产品订购信息:
P2810 考马斯亮蓝G250染料试剂 100ml / 500ml
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