三磷酸腺苷酶( adenosine triphosphatase，ATPase)是一种水解酶，是催化ATP合成的一种酶。
ATPase染色试剂盒(钙钴法) 酶类染色

诺博莱德 ATPase染色试剂盒(钙钴法)，ATPase Stain Kit(Calcium-Cobalt Method)

ATPase染色试剂盒(钙钴法)   酶类染色

产品货号：G0168

产品名称：ATPase染色试剂盒(钙钴法)，ATPase Stain Kit(Calcium-Cobalt Method)

产品规格：5*50ml

产品简介：

中文名称：ATPase染色试剂盒(钙钴法)

英文名称：ATPase Stain Kit(Calcium-Cobalt Method)

规格：5*50ml

储存条件：2-8℃，避光保存，有效期6个月。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder G0168 ATPase染色试剂盒(钙钴法)，ATPase Stain Kit(Calcium-Cobalt Method)产品介绍

三磷酸腺苷酶( adenosine triphosphatase，ATPase)是一种水解酶，是催化ATP合成的一种酶。三磷酸腺苷酶根据所用激活剂、抑制剂以及酶定位的不同分为膜性三磷酸腺苷酶、肌球蛋白三磷酸腺苷酶、线粒体三磷酸腺苷酶等。ATPase能水解三磷酸腺苷为磷酸腺苷和磷酸，此酶只作用于磷酸与磷酸之间的高能键，因而释放大量能量。其催化反应如下： A-P-P-P + H2O→A-P-P + H3PO4 +能量。

 三磷酸腺苷酶染色试剂盒(钙钴法)原理在于肌球三磷酸腺苷酶（mATPase）水解三磷酸腺苷为二磷腺苷和磷酸的反应具有pH依赖性，进而利用不同pH对mATPase活性的影响来进行肌纤维分型染色区分。

自备材料：

1%氯化钙溶液

操作步骤：(仅供参考)

本试剂盒不建议使用固定后样本染色。如需固定或脱水不可使用含乙醇、甲醇或丙酮以及磷酸盐成分辅助试剂。染色结果如需长期储存可在显色还原前使用水基固定液固定。

切片预处理

1. 冰冻切片滴加少许37℃预热的酸/碱预孵育液覆盖组织复温1min。（具体酸碱孵育液选择同步骤2）

2. 一张切片滴加碱性预孵育液孵育15min，倾去多余液体。另一张切片入酸性预孵育液孵育5min，稍倾去后滴加碱性预孵育液孵育30s，倾去多余液体。

染色步骤

3. 孵育过程中按照1：49的比例混匀底物储备液和染色缓冲液制备ATPase染色工作液，置于37℃预热， 即配即用。用量根据组织大小分配100-200ul/组织切片即可。

4. 预孵育后的切片滴加预热的ATPase染色工作液，37℃孵育30-45min。

5. 1%氯化钙处理3次，每次1min，每次处理后倾去多余液体，不可大力冲洗。

6. 滴加适量Co溶液覆盖切片3min，蒸馏水浸洗4次每次3min。

7. 在上述过程中配制显色工作液，即取适量试剂(E)在通风橱内用蒸馏水稀释50倍，即为显色工作液， 即配即用。切片入显色工作液孵育1-2min至切片呈均匀黑褐色。流水洗10min或蒸馏水浸洗4次每 次3min。

8. 切片倾去多余水分后使用预热融化的甘油明胶封片剂封片后光学显微镜观察。

注意事项：

1. 切片入ATPase染色工作液前后不可用水冲洗。

2. 若要鉴别肌纤维所属类型，最好用连续冰冻切片，同时注意避免切片在孵育和染色过程中干燥变形。

3. 配好的ATPase底物储备液易失效，建议配好后分装成小份置于-20℃保存，可保存至少1年。2-8℃冰箱可保存至少1月，室温放置建议3天内使用完毕，不建议反复冻融。配好的ATPase染色工作液随着溶液中沉淀量增加而逐渐失效，配置容器底部观察到明显白色沉淀时不可使用，预热充分后建议在4-6 小时内使用完毕。

4. 显色液具有腐蚀性和刺激性气味，应在通风橱内小心操作。显色液易被氧化失效，2-8℃密闭可保存至少6个月，溶液变无色或出现黑色沉淀时不可使用。稀释后的显色工作液随时间推移颜色会逐渐变浅，建议在2小时内使用完毕。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

ATPase染色试剂盒(钙钴法)   酶类染色

产品订购信息：

NobleRyder G0168 ATPase染色试剂盒(钙钴法)，ATPase Stain Kit(Calcium-Cobalt Method) 5*50ml