2× HotMaster Taq PCR Master Mix(含染料)
2× HotMaster Taq PCR Master Mix PCR相关
目录号:71113
产品内容
产品成份 | 71113-05 | 71113-0100 |
2× HotMaster Taq PCR Master Mix | 5x 1ml | 100x 1m |
保存条件
-20℃保存,有效期 2 年。
经常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 个月。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
产品简介
本产品包含HotMaster Taq DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×,采用了国际上最新zhuan利的合成亲和性配体技术,该配体可以以一种温度依赖性的方式来可逆性地阻断酶的活性。温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR 扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了PCR 反应的精确性。
适用于扩增各种小于6Kb的DNA模板!PCR产物3’端带A头,纯化后可直接用于TA载体克隆(Cat#V114-20)。
本产品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、测序等后续操作。
产品特点
1. 高产:产量是普通 Taq 酶的 2 倍!
2. 高效:延伸速度 5-10s/kb,一般 0.5 小时完成 PCR!
3. 高成功率:对于高 GC 模板和特殊结构的复杂模板有良好效果!
使用说明:
一、配制 PCR 反应体系:(于冰上配制)
Component | 20 μl Reaction | 50 μl Reaction | 终浓度 |
2×HotMaster Taq PCR Mix | 10 μl | 25 μl | 1 × |
Forward Primer (10 μM) | 0.4 μl | 1 μ | 0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.4 μl | 1 μ | 0.2 μM |
Template DNA | as required | as required | |
ddH2O | up to 20 μ | up to 50 μ |
参考模板用量(50 μl 反应体系):
质粒:0.1-10 ng;细菌基因组:10-100 ng;人类基因组:50-150 ng;cDNA:1-5μl 。
二、建议 PCR 循环条件:
Step | Temperature | Time | Cycle Number |
Initialdenaturation | 94℃ | 5 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 10 seconds |
30-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 15 seconds | |
Extension | 72℃ | 15 seconds / kb | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
三、结果检测:反应结束后取 5µl 反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
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