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诺博莱德 酵母核糖体提取试剂盒（低速离心法）
酵母核糖体提取试剂盒(低速离心法)蛋白提取
- 产品货号：P5141
- 产品名称：酵母核糖体提取试剂盒（低速离心法）
- 产品规格：50T/100T
- 适用样本：酵母
- 储存条件：2-8℃，12个月
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
一、产品特点
低速离心法：采用低速离心技术，操作简便，适合实验室常规设备；
高效提取：能够高效提取酵母核糖体，提取的核糖体具有完整的生物活性；
兼容性强：提取的核糖体可用于多种下游实验，如Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀等。
二、使用方法
1、细胞准备：
- 取1-2×10⁷个酵母细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，收集细胞。
- 用冷PBS洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
2、提取步骤：
- 加入500μL冷的试剂A，置冰上10分钟。
- 用匀浆器充分匀浆，然后在4℃，1000×g力条件下离心5分钟。
- 将上清吸入另一预冷的干净离心管，在4℃，11000×g力条件下离心10分钟。
- 将上清再次离心（12000-16000×g，10分钟），弃沉淀，留上清。
- 在上清中加入125μL试剂B，充分混匀，2-8℃静置过夜。
- 在4℃条件下，10000×g离心20-45分钟，小心移除上清，收集沉淀。
- 沉淀即为核糖体。
3、注意事项：
- 实验过程中的所有试剂须预冷，所有器具须放-20℃冰箱预冷。
- 整个过程须保持样品处于低温，以避免蛋白降解。
- 最好使用Dounce匀浆器匀浆，如果没有，也可用普通玻璃匀浆器，但核糖体蛋白回收率会下降。
