诺博莱德 酵母线粒体提取试剂盒
酵母线粒体提取试剂盒 蛋白提取
产品货号:P5136
产品名称:酵母线粒体提取试剂盒
产品规格:50T/100T
产品简介:
中文名称:酵母线粒体提取试剂盒
规格:100T ; 50T
储存条件:2-8℃,1 year
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder P5136 酵母线粒体提取试剂盒
适用样本:酵母
注:
1. 酵母洗涤液长期不用可以-20℃保存。
2. 试剂拆封后请尽快使用完!
产品简介:
线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化,并通过偶联磷酸化生成ATP,供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的。
酵母线粒体提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种酵母样品中提取线粒体。提取过程简单方便。
本试剂盒不能用于冷冻样品的线粒体提取。
自备试剂和仪器:
离心机、振荡器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒、PBS缓冲液、离心管、吸头、一次性手套
使用方法:
一、使用注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得优良实验效果
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
二、酵母线粒体提取:
1. 酵母培养物,在4℃,1000×g 条件下离心5-10 分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集酵母沉淀。
2. 用PBS洗涤酵母两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每100μl 体积或100mg湿重酵母沉淀物中加入400μl酵母线粒体提取液A,混匀后,在30℃条件
下保温 15 分钟。
4. 在1000×g 条件下离心 5-10 分钟,收集酵母沉淀。
5. 用300μl 酵母洗涤液D洗涤酵母一次,离心收集酵母。
6. 酵母沉淀物中加入500μl 酵母线粒体提取液B,充分混匀后。
7. 在37℃或室温条件下轻微振荡60-90分钟。
8. 在2000×g 条件下离心5-10分钟,弃上清,收集沉淀。
9. 沉淀用300μl酵母洗涤液D洗涤两次。离心收集沉淀。
10. 在沉淀中加入400μl酵母线粒体提取液C,充分混匀,然后在振荡器上振荡10-30分钟。
11. 在4℃,500×g条件下离心5分钟,弃沉淀,收集上清。
12. 将上清吸入另一干净离心管。
13. 在4℃,12000×g条件下离心20分钟。弃上清,收集沉淀。
14. 在沉淀中加入400μl线粒体保存液 E,混匀。
15. 在4℃,12000×g条件下离心20分钟。弃上清,收集沉淀。即得到酵母线粒体样品。
16. 根据下游实验需要,将沉淀用相应的缓冲溶液重悬。置冰箱备用或直接用于下游实验。
注意事项:
1. 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并che底清除残留清洁剂。
3. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
4. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
5. 如果试剂不小心接触皮肤或眼睛,应立即用水冲洗。
酵母线粒体提取试剂盒 蛋白提取
产品订购信息:
P5136 酵母线粒体提取试剂盒 50T/100T
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