诺博莱德 脂多糖(LPS)提取试剂盒
脂多糖(LPS)提取试剂盒 常备现货
产品货号:P4975
产品名称:脂多糖(LPS)提取试剂盒
产品规格:50T/100T
产品简介:
中文名称:脂多糖(LPS)提取试剂盒
规格:100T ; 50T
储存条件:2-8℃,1 year
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder P4975 脂多糖(LPS)提取试剂盒
产品简介:
脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分,结构很复杂、热稳定性ji高(在250℃下干热灭菌2h才wan全灭活)。受LPS发现的历史原因,如今LPS的概念几乎等同于内毒素(endotoxin)。LPS由多糖链和脂质A组成,不同细菌间的多糖链是高度变化的,决定细菌的血清型;而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。
由于LPS与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究,如阐明LPS 的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤。
LPS提取试剂盒采用简单步骤即可快速提取细菌脂多糖,提取产量高,省时,蛋白质和核酸污染低。
适用样本:细菌
注:试剂拆封后请尽快使用完!
产品特点:
1、适用性广,能从所有革兰氏阴性菌中提取 LPS。
2、操作简单方便。
3、提取 LPS 下游应用广,包括直接用于免疫刺激。
使用方法:
一、使用注意事项:
1. 离心机转速有相对离心力(RCF,×g)和每分钟转速(RPM)两种表示方式,有些离心机设置有RPM和×g显示切换,但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算:g=r×1.118×10-5×rpm2(r为有效离心半径,即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度,单位为厘米)例如:转速为3000rpm,有效离心半径为10 cm,则相对离心力(RCF,×g)为=10×1.118×10-5×30002=1006.2(×g)。
2. 可以用试剂盒或者ben酚硫酸法进行脂多糖定量。
二、脂多糖(LPS)提取:
1. 室温 8000×g 离心 3 分钟收获细菌细胞。
2. 加入 500μl 试剂 A 重悬细菌,8000×g 离心 3 分钟,弃上清。
【注】:
每次处理 50 mg-200 mg 湿重菌体均可。
3. 收集沉淀,加入 500μl 试剂 A 重悬沉淀,8000×g 离心 3 分钟,弃上清。
4. 收集沉淀,加入 500μl 提取液 B 重悬沉淀。
5. 在 150-300w 超声 10 秒间隔 10 秒,超声 5-15 分钟。
【注】:
没有超声条件可以不超声。
如果超声时出现黑色沉淀,说明超声功率过大,需要降低功率。
避免产生泡沫。
6. 在 10000×g 离心 10 分钟取上清。
7. 在上清中加入 500μl 提取液 C,剧烈涡旋 20 秒充分混匀。
8. 在 66-68℃水浴或气浴孵育 30 分钟。中间隔 10 分钟用移液器轻轻吹打混匀。
9. 置 4℃静置过夜。
【注】:
急用的样本可以将 4℃静置时间缩短至 2 小时。
10. 在 4℃,3000×g 离心 20 分钟。
11. 取最上层上清至另一干净离心管,即得脂多糖样品。
【注】:
样品中含有盐。如果有需要可以透析或超滤脱盐后再用于下游实验。
透析或超滤脱盐后冻干称重,根据需要溶解到合适浓度用于下游实验。
注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得优良实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并che底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
脂多糖(LPS)提取试剂盒 常备现货
产品订购信息:
P4975 脂多糖(LPS)提取试剂盒 50T/100T
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